铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年附生草本植物,是我国特有的珍稀濒危物种,为历史悠久的名贵中药。研究发现铁皮石斛的主要药效成分为多糖,多糖是一类重要的生物活性成分。现代药理研究表明,铁皮石斛具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用,在临床及中药复方中被广泛应用。然而,铁皮石斛的体内抗衰老和免疫调节作用及其机理尚有待阐明,本研究采用人工培植的铁皮石斛鲜品,榨汁并分离纯化得铁皮石斛多糖,对此进行研究。本论文首先从制备铁皮石斛供试品的方法出发,取新鲜铁皮石斛,清洗、剪碎,用榨汁机榨汁,得铁皮石斛榨汁液,经过醇沉得铁皮石斛多糖,经洗涤、低温干燥得到灰白色粉末状铁皮石斛多糖,按照2010版中国药典采用苯酚-硫酸法对供试品多糖含量进行了测定,消除不同批次供试品之间的差异。继而对铁皮石斛进行药效初步筛选,采用二甲苯致耳廓肿胀法和腹腔染料渗出法测定其抗炎能力,应用小鼠游泳法研究其抗应激作用,碳粒廓清法测定单核巨噬细胞吞噬功能,对去势雌性小鼠的血清SOD、MDA的测定以及测定胸腺、脾脏重量计算脏体系数。结果发现铁皮石斛能抑制二甲苯致耳廓肿胀和抑制腹腔染料渗出,表明其具有一定的抗炎能力；高剂量榨汁液能延长小鼠游泳时间；高剂量榨汁液能提高碳粒廓清率促进单核巨噬细胞吞噬功能；能增加去势雌性小鼠的血清SOD、降低MDA,增加其免疫器官胸腺、脾脏重量；榨汁液的抗炎、增强免疫效果优于水提液。在发现铁皮石斛具有抗炎、抗应激和免疫调节作用的基础药效上,我们将其应用到衰老小鼠的模型中,分别是D-半乳糖致亚急性衰老雌性小鼠模型和自然衰老雌性小鼠模型。首先,先进行跳台、迷宫等有关学习记忆能力的行为学实验；然后测定其脏器系数；最后并对各重要器官进行病理检查分析。在亚急性衰老小鼠模型中,与亚急性衰老模型组相比,研究结果发现铁皮石斛能降低小鼠通过迷宫的时间,降低跳台实验的错误次数；能增加胸腺、脾脏的重量；脏器病理检查分析表明能改善子宫、卵巢、脾脏等病理变化。在自然衰老雌性小鼠中,铁皮石斛同样能缩短小鼠通过迷宫的时间,降低跳台实验的错误次数；能显著增加自然衰老雌性小鼠的卵巢、胸腺、脾脏系数,降低衰老小鼠子宫肿胀的程度；脏器病理检查分析表明能改善自然衰老小鼠子宫、卵巢、脾脏等病理变化。在这两个衰老模型的药效上铁皮石斛显示出在整体上的抗衰老作用,提示其在增强学习记忆能力、增强免疫、整体上改善脏器病变等方面尤为出色。在确实了铁皮石斛的抗衰老作用后,我们进一步探索其作用机理。首先,从自由基与衰老的关系入手,以试剂盒测定小鼠血清和重要脏器的SOD、GSH-Px等抗氧化指标,发现铁皮石斛能显著增加血清、心、肝、肾的SOD,增加血清GSH-Px,增加肝CAT的水平,表明其能提高体内抗氧化酶类,抵御自由基对脏器的攻击。其次,从免疫-炎症-衰老的机理探索,采用流式微球分析法测定血清中炎症细胞因子IL-12p70、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、IL-10、IL-6的含量,Western Blot法测定雌性小鼠的重要脏器卵巢中NF-κB通路p-NFκBp65、IκB-α蛋白的表达,结果发现铁皮石斛能降低血清中促炎症因子IL-12p70、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、IL-6等的水平,升高抑制炎症因子IL-10的水平,能抑制卵巢p-NFκBp65蛋白的表达。这一实验论证了衰老是一个慢性炎症的过程,抑制炎症的发生发展可以达到抗衰老的目的,铁皮石斛多糖抗衰老作用优于榨汁,说明多糖成分可能是一个良好的抑炎剂。再次,利用体外实验从侧面反映铁皮石斛抗衰老的作用,体外培育小鼠脾淋巴细胞,运用MTT法测定铁皮石斛多糖对正常小鼠及衰老小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响,发现铁皮石斛多糖能增加正常小鼠及衰老小鼠脾淋巴细胞增殖,尤其对衰老小鼠的脾细胞作用明显,这表明铁皮石斛在增强免疫方面的突出功效可能主要在于多糖的生理活性。总而言之,铁皮石斛具有体内抗衰老的作用,其机理是一方面通过增强血液中的抗氧化酶活性、促进脾淋巴细胞增殖,另一方面抑制促炎症因子的释放、抑制NF-κB通路,从而达到抗氧化、促进免疫、抑制炎症来达到抗衰老的目的。