刺参弧菌病病原菌分离、鉴定及防治研究

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分离鉴定了青岛地区三个养殖场发病刺参携带的18株细菌,经PcR筛选、生理生化鉴定,其中A-1、A-2、A-4为美人鱼弧菌,A-10、A-11、A-12为海蛹弧菌,A-9为副溶血弧菌,A-3、A-5、A-6为杀鲑气单胞菌史氏亚种,A-7、A-8为松鼠葡萄球菌,A-13、A-17、A-18为海单胞菌,A-14、A-15、A-16为交替单胞菌。 将18株分离菌进行回归试验,三株美人鱼弧菌可以引起刺参发病。比较了浸染、创伤感染、注射三种方式,证明创伤感染是引起刺参发病的主要途径;注射方式致死刺参速度最快,创伤方式次之,浸染方式最慢。18株细菌混合后可以引起刺参死亡率增加,可能细菌之间有协同作用。病原菌在溶氧5.0mg/L的条件下对刺参的致死率比8.0mg/L条件下明显上升,说明溶氧对刺参发病有很大影响。三株病原菌适宜生长条件为盐度10‰-50‰,pH5-10,16℃-28℃。 药敏试验显示环丙沙星,依诺沙星,恩诺沙星,红霉素,壮观霉素,左氧氟沙星,链霉素对三株美人鱼弧菌都有较强抑制作用,进一步测定了敏感药物的MIC、MBC。大蒜汁对两株美人鱼弧菌A-1,A-4有较强杀灭作用,但是对A-2株没有抑制效果。成功筛选到1株乳酸菌,命名为B-1株,生理生化鉴定为嗜酸乳杆菌。其胞外产物对美人鱼弧菌具有较好的抑制作用,并且进一步探讨了胞外产物的抑菌特性,该菌株的抑菌成分对热不敏感,蛋白酶K对其活性有较大影响。成分可能是细菌素。研究了B-1株产生的细菌素量和生长曲线的关系;比较了吐温80、聚乙二醇6000、吐温20三种刺激因子对B-1株产细菌素的影响,证明吐温80效果最好,并确定了最佳加入量为0.15%。确定了B-1株37℃培养温度细菌素产量最大。
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