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抗生素的使用甚至是滥用导致了全球范围内多重耐药菌的广泛传播。耐药基因的水平转移是导致细菌耐药性频发的主要原因之一,整合子作为细菌内常见的移动遗传元件,在耐药基因的水平转移过程中发挥着很大的作用。Ⅰ型整合子是最常见的整合子,具有捕获、整合和切除耐药基因的活性。它主要是有以下几部分组成：编码整合酶的intI基因,attI重组位点,负责耐药基因盒转录表达的启动子P。以及调控整合酶转录表达的启动子Pint。Pc启动子有时会与另一个启动子P2联合起作用,目前已经发现了几种不同强度的P。变体,但是在我国水环境中有关P。变体的相对分布的研究还没有太清楚。P。启动子和整合子启动子反向重叠,它的结构和转录活性会影响着整合酶的表达,已经有研究表明整合酶启动子P…有LexA盒(LexA box),是细菌中的一个关键SOS反应蛋白。因此,有关SOS反应与细菌整合酶与耐药基因盒表达调控的研究已经成为了研究热点。已有研究表明在霍乱弧菌中,整合酶与基因盒的表达是共调节的。某些抗生素的加入会诱导细菌产生SOS反应,从而增强其整合酶的表达活性。在营养丰富培养基、高温、和高盐浓度中,两种启动子活性均有增强,然而在大肠杆菌中,关于SOS反应对整合酶与基因盒表达方面的研究却鲜有报道。本文首先对从济南五个不同水环境取样点采集水样中分离的多重耐药菌整合子的P。启动子进行鉴定,通过PCR的方法,共发现4种Pc启动子变体,分别为PcW、PcWTGN-10, PcH1和PcW-P2,其中PcWTGN-10和PcW-P2是其他两种启动子的重组产物,在自然水环境中四种Pc所占比例分别为54.29%,34.26%,8.57%和2.88%,低强度Pc启动子存在频率较高。在前面调查工作的基础上,我们克隆了其中三种具有代表性的P。变体(PcW、PcWTGN-10、PcH1),和Pint一起以双向启动子方式连接入载体质粒,通过不同条件对其进行诱导,观察Pc与Pint的变化关系,分析其调控机制。结果发现在没有任何选择压力存在的条件下,三种P。的强弱关系依次为PcWTGN-10≈PcH1>PcW;而与之对应的Pint的强弱关系则是刚好相反,即为Pint (PcW)
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