核苷酸切除修复基因XPB反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

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核苷酸切除修复作为细胞内重要的DNA修复系统,可以修复由太阳光中短波长紫外线引起的DNA损伤,众多化学物质引起的大片段DNA加合物以及一些氧化性损伤等.整个NER修复系统至少包括30种蛋白,主要有XPA~G、RPA等,任何一种NER蛋白功能的缺失会引起稀少的常染色体隐形疾病着色性干皮病、科凯恩综合征、毛发硫营养障碍症等.作为NER的核心因子之一和通用转录因子ⅡH的p89亚单位,着色性干皮病B基因在NER和转录起始中表现出ATP依赖的3-5解旋酶活性,是NER解旋阶段必不可少的NER因子.另外DNA损伤修复系统在保护正常组织免受基因毒性物质影响的同时,也可引起肿瘤对化疗药物的获得性耐药.肿瘤细胞的耐药常伴随DNA损伤修复基因表达增强,采取反义策略降低细胞的DNA损伤修复能力可以增加肿瘤细胞的药物敏感性.因此探讨XPB基因对细胞DNA损伤修复能力及抗肿瘤药物耐药性的影响非常有意义.在该研究中,我们拟构建出能在哺乳动物细胞中表达XPB反义RNA的表达质粒pcDNA-XPB/AS,在此基础上进一步研究XPB基因功能和其对化疗药物敏感性的影响.
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