人消化系统细胞系L02、HepG2、SGC7901、SW480中SCF的表达及其与肿瘤关系的研究

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目的:以L02、HepG2、SGC7901、SW480四种细胞为研究对象,在基因和蛋白质水平检测干细胞因子(Stem Cell Factor,SCF)在四种细胞中是否表达及其表达水平。通过比较L02和HepG2中SCF表达水平,探讨SCF与肝癌发生的关系;通过比较SGC7901、SW480、HepG2抑制组和非抑制组中SCF表达水平的差异,探讨SCF与胃癌、结肠癌、肝癌的关系,阐明SCF在消化系统肿瘤发生中的作用。方法:采用MTT方法筛选药物半数抑制浓度(IC50),以1/2IC50作为实验用药物浓度。取对数生长期的L02、HepG2、SGC7901、SW480细胞,采用RT-PCR和Western blotting方法分别检测四种细胞中SCF mRNA和蛋白质表达情况;分别取对数生长期的L02、HepG2、SGC7901、SW480细胞培养24h后随机分为抑制组和非抑制组。抑制组在含1/2IC50的CDDP培养液中继续培养24h,非抑制组在不含CDDP的培养液中继续培养24h。采用RT-PCR方法检测SCF的mRNA表达量,用Western Blotting方法检测SCF蛋白质表达水平,探讨SCF与消化系统肿瘤发生的关系。结果: CDDP对L02、HepG2、SGC7901、SW480四种细胞作用的IC50值分别为76.7±0.4μmol/L,40.6±0.6μmol/L,54.8±0.2μmol/L和66.9±0.2μmol/L。L02、HepG2、SGC7901和SW480细胞均有SCF表达,其mRNA表达量依次是0.767±0.012,0.617±0.038,0.589±0.087,0.546±0.077 ;蛋白质表达量分别是0.905±0.005 , 0.713±0.060 ,0.353±0.055,0.606±0.165。CDDP抑制后四种细胞的SCF mRNA表达量依次是0.484±0.005,0.250±0.080,0.401±0.065,0.167±0.025;蛋白质表达量分别是0.630±0.013,0.440±0.115,0.293±0.072,0.317±0.046。L02和HepG2细胞抑制组的SCF mRNA及蛋白质表达量均低于非抑制组,差异有统计学意义(P<0.05);HepG2细胞非抑制组SCF mRNA和蛋白质表达量与L02非抑制组比较均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。在SGC7901、SW480和HepG2三种细胞抑制组中SCF mRNA表达量均较非抑制组减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。SGC7901细胞抑制组SCF蛋白质表达量与非抑制组比较虽显示数量减少,但差异无统计学意义(P>0.05);SW480、HepG2细胞抑制组SCF蛋白质表达量与非抑制组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论: SCF在L02、HepG2、SGC7901和SW480四种细胞中均有表达。在L02细胞中SCF mRNA及蛋白质表达水平比HepG2高,说明胚胎时期肝细胞表达的SCF处于高水平;CDDP抑制L02、HepG2细胞增殖后,两种细胞中SCF mRNA及蛋白质表达均下调,提示肝组织癌变后SCF表达量可能下调,SCF可能与肝癌发生有关。CDDP抑制SGC7901、SW480和HepG2细胞增殖后,SCF mRNA在三种细胞中表达量均下调;SCF蛋白质表达量也都下降,除SGC7901外,其他组差异均有统计学意义(P<0.05),表明SCF在促进结肠癌、肝癌细胞增殖方面有一定作用,推测消化系统胃、结肠、肝组织发生癌变时SCF表达水平会升高,检测细胞中SCF基因和蛋白质表达量可以帮助了解组织细胞的癌变情况。对SCF表达的监测、调控和干预可能成为辅助诊断或临床治疗结肠癌、肝癌的新途径。
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