布鲁氏菌病（Brucellosis）是当今世界上广为流行的人畜共患的慢性传染性疾病，在我国被列为二类传染病。该病由革兰氏阴性细菌布鲁氏菌属（Brucella）的病原菌感染而引起，人感染后呈现波浪热以及关节痛和睾丸炎等临床症状，动物感染后会造成流产、不孕不育和组织坏死等严重的后果。近十多年来，牲畜感染布鲁氏菌病的数量不断增加，我国感染布鲁氏菌病的人数持续上升，布鲁氏菌病已经成为阻碍牧区经济发展的重要因素，严重威胁了人类健康。目前，在世界范围内，布鲁氏菌病还不能被完全治愈，所以，关于布鲁氏菌及布鲁氏菌病的研究和防治工作尤为重要，对布鲁氏菌病最主要的防控措施是接种疫苗。布鲁氏菌外膜蛋白（Omp）是可以引起保护性免疫反应的一种细菌表面蛋白，一直被视为关于布鲁氏菌研究的重点；细胞质结合蛋白被认为与布鲁氏菌的致病性相关，可诱导机体产生强烈的免疫反应。本文以布鲁氏菌细胞质结合蛋白基因P39和抗原表位基因（omp10、omp19、omp22、omp25、omp28）为研究对象，以猪型布鲁氏菌疫苗S2弱毒活疫苗菌株的全基因组DNA为模板，设计引物克隆目的基因，将得到的目的基因插入质粒载体中，成功构建重组质粒pET-28a-omp10、pET-28a-omp19、pGEX-4T-1-omp22、pET-28a-omp25、pET-28a-omp28和pGEX-4T-1-p39，经PCR检测和测序鉴定正确后，导入到表达菌株中，IPTG诱导表达蛋白，重组蛋白经聚丙烯酰胺变性凝胶电泳（SDS-PAGE）检测分析。实验结果表明，重组蛋白可以成功表达，Omp10、Omp19、Omp22、Omp25、Omp28、P39蛋白的分子量分别为38.5kD、17.6kD、47kD、53.5kD、52.5kD、39kD，与预期一致。将纯化后的蛋白与弗氏佐剂混合后免疫家兔，取血清后进行免疫血清的Western blot检测，结果显示，Omp22、P39蛋白刺激机体产生了相应的抗体，具有良好的免疫原性。本试验为进一步筛选的确有效的布鲁氏菌亚单位疫苗提供参考。