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目的 本研究的目的是，设计并构建条件性位置偏爱实验计算机视频跟踪系统，并用不同剂量的海洛因诱导建立大鼠条件性位置偏爱(conditioned place preference，CPP)模型，用色氨酸羟化酶抑制剂对氯苯丙氨酸(PCPA)耗竭中枢神经系统5-羟色胺(5-HT)递质，观察大鼠海洛因诱导CPP的变化。在此基础上探讨中枢5-HT功能低下对海洛因精神依赖的形成以及对海洛因成瘾行为复燃的影响。 材料与方法 1 系统构建：视频跟踪大鼠CPP实验系统由大鼠穿梭盒、隔音箱、摄像系统和一台计算机组成。视频图像采用Mice Track软件分析。 2 实验动物：雄性Sprague-Dawley大鼠72只，其中24只被随机分为3组，每组8只，进行海洛因诱导CPP模型建立的实验，另48只分为6组，每组8只，进行PCPA对海洛因诱导大鼠CPP影响的实验研究。 3 方法 3．1 海洛因诱导大鼠CPP试验包括三个步骤： (1)给药条件化处理：用封闭式隔板将灰区和黑区完全隔离。选择灰区为伴药盒。采取每日两次腹腔注射药物的训练程序，上午海洛因组大鼠分别注射海洛因0.5mg／3ml／kg、1mg／3ml／kg后立即放置灰区训练30分钟，下午注射生理盐水3ml／kg，立即置入黑区训练30分钟。如此轮回6次。对照组训练每次给予生理盐水外，余与海洛因组相同。 (2)位置偏爱测试：最后一次训练24小时后，采用通道型隔板，将大鼠放入穿梭盒20分钟，摄录视频图像，观察大鼠在灰区和黑区分别停留的时间和活，好辽大，笋砰士学世忿戈.动距离:自然消退10天后再次摄录20分钟的视频图像，测定位置偏爱效应。 (3)戒断症状评分:第一次测定C即后，三组大鼠给予纳络酮4mg/kg腹腔注射，进行催促戒断评分。3.2 pCPA对海洛因诱导大鼠C即影响的实验。把PC队按一定剂量(0mg/kg、IO0mg/kg、300mg/kg)连续3天腹腔注射大鼠后，进行海洛因诱导的CPP试验，CPP试验方法如前所述。自然消退第7、8、9天再次腹腔注射pCPA，观察C即消退情况。C即观察完成后，大鼠心脏取血，严格按照Serotonin RIA试剂盒要求的步骤测定血小板5一HT含量。4观察指标和分析方法 研究分析的指标有大鼠在灰区停留时间、总运动距离、穿梭次数、戒断症状评分及血小板5一HT含量。统计分析方法包括Kruskal一Wallis检验及Bonferroni法多重比较、Wilcoxon符号秩和检验、单因素方差分析及LSD法多重比较、Kendall’8 tua一b秩相关检验等。结果l系统性能 在本实验系统中，大鼠在稳定的低噪音、低照度、通风良好、较少外界干扰的穿梭盒中自由活动。通过视频跟踪，实现计算机上实时观察并记录大鼠活动，成像清晰稳定，可重复观看，实验资料直观、客观。 Mioe Track软件操作灵活、简便，可同时分析多个指标。2海洛因诱导大鼠CPP的建立、消退和运动活性的变化2.1海洛因诱导大鼠C即的建立、消退 训练结束24小时后，海洛因条件化训练组大鼠伴药盒内停留时间显著高于对照组(P<0 .05)。经过10天消退期，大鼠仍维持对伴药盒的偏爱。消退期后大鼠伴药盒内停留的时间高于消退前(P<0.05)。2.2海洛因诱导大鼠CPP建立与消退后运动活性的变化 训练结束24小时后与消退期后，海洛因条件化训练组大鼠穿梭盒内运动的距离和穿梭次数与对照组相比均无统计学差异。2.3大鼠灰区内停留时间、运动距离和穿梭次数两两相关性分析葫艺几才学硬全学夕蔚戈门 总活动距离与穿梭次数间呈强正相关关系(r二0.787，P<0 .001):灰区内停留时间与总活动距离、穿梭次数间呈弱正泪关关系(分别r二0.287，P<0 .01;r== 0 .205，P(0.01)。3尸CPA对海洛因诱导大鼠CPP建立和消退及运动活性的影响3.1 CPP的建立和消退 训练结束24小时后及消退期后6组大鼠伴药盒内停留时间均具有统计学差异(分别广=25.797，p=0.0001;广=25.065，p=0.0001)。接触PCPA或海洛因均可增加大鼠灰区内停留时间，而PCPA处理对海洛因诱导大鼠CPP形成影响不大。消退前后自身比较具有统计学差异(Z二一8.507，p<0 .001)，接触海洛因的PCPA低、中剂量组消退后伴药盒内停留的时间高于消退前(分别增加121.64士32一95和182士43.265)，差异具有显著性(分别Z=一1.976，P=0.043;Z=一1.998，P=0.042)，而且，随着PCPA剂量由0 mg/kg加大为100mg/kg，伴药盒内停留时间增加更显著(F=8.47，p<0 .05)，说明与海洛因相联系的环境线索 (伴药盒)使大鼠觅药行为敏感化，PCPA具有增加消退期海洛因依赖大鼠对环境线索的敏感作用。3.2运动活性 PCPA及海洛因均增加消退期大鼠的穿梭次数，但PC队对海洛因诱导大鼠总活动距离和穿梭次数影响不大。3.3血小板5一HT含量 单独海洛因处理组大鼠血小板5一HT含量显著高于NS组(P<0 .01)，PCPA处理组大鼠血小板5一HT含量显著低于NS组(P<0 .01)。3.4血小板5一HT与大鼠灰区内停留时间、活动距离、穿梭次数两两比较相关分析 5一HT含量与灰区内停留时间呈中等程度的负相关(r二一0.441，P=0.000)，与总活动距离无相关性(r=o.015，P=0 .88)，与穿梭次数呈