目的:　　促肾上腺激素皮质释放激素(Corticotropin releasing factor，CRF)是由下丘脑PVN区神经元合成并分泌的一种应激神经肽，其受体包括CRFR1和CRFR2受体。它们在下丘脑-垂体-肾上腺轴（Hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA）的功能中起重要作用。　　类胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factor，IGF）家族包括两种配体(IGF-1和IGF-2)，相应的受体（IGF-1R和IGF-2R）及六种结合蛋白(IGFBP1～6)。IGF家族在调节细胞增殖、存活、分化和迁移等方面具有重要的生物学功能。　　我们实验室主要研究低氧神经内分泌网络调节机制，CRF及其受体起核心作用，低氧影响肝脏和脑组织的IGF家族表达，本实验通过整体动物和细胞学实验，研究低氧下CRF家族和IGFBP家族可能的调节机制，以及低氧对相关细胞因子的影响;利用敲除IGFBP2小鼠比较CRF家族和IGF家族的组织表达特异性;在AtT-20细胞系上研究了转录因子AP-1和NF-κB对CRFR1和IGF-1R受体转录的调节。　　整体水平上，本实验利用低压低氧舱模拟7 km低氧环境，研究大鼠暴露于急性低氧（1、4、8和24 h）和拮抗剂(PDTC，NF-κB拮抗剂和CP154，526，CRFR1拮抗剂)处理后，皮层和垂体CRF，CRFR1和IGF家族基因表达变化，并利用IGFBP2敲除的小鼠和正常野生型C57小鼠比较研究CRF家族和IGF家族在皮层和海马区的基因表达变化。　　细胞水平上，利用AtT-20细胞系，给予CRF孵育，研究转录因子AP-1和NF-κB对CRFR1和IGF-1R的转录调节。　　方法:　　整体实验:　　1.大鼠实验:大鼠暴露于低氧舱模拟的低氧（7 km，1、4、8和24 h），动物分组为:对照组，不同时间的低氧暴露组，拮抗剂组，低氧后收集垂体，皮层和血液白细胞。　　2.小鼠实验:不同发育年龄的C57小鼠和IGFBP2 knock-out小鼠，在出生15d和45d分别收集海马和皮层。　　细胞实验:　　利用小鼠垂体瘤细胞系（AtT-20），分为对照组，CRF处理组(10nM)，拮抗剂组(AP-1或NF-κB inhibitor)，拮抗剂+CRF组等。研究CRF通过转录因子AP-1和NF-κB调节CRFR1和IGF-1R转录。　　研究采用实时定量PCR和Western-Blot进行检测。　　结果:　　1.急性低氧呈低氧时间（7km，1，4和8h）相关地增加大鼠垂体CRF mRNA的表达，24 h时降低但仍高于对照水平;急性低氧1，4，8h显著降低大鼠垂体CRFR1 mRNA的表达，但24 h时回到对照水平。　　2.急性低氧7km8h明显降低了大鼠垂体和皮层IGF-1 mRNA表达;低氧4，8h增加了垂体和皮层IGF-1R mRNA的表达。　　3.NF-κB拮抗剂和CRFR1拮抗剂部分阻断了低氧诱导的垂体CRF mRNA表达增加;也阻断了低氧诱导的垂体CRFR1 mRNA表达的下降和垂体IGF-1R mRNA的增加。但是NF-κB拮抗剂不能阻断低氧诱导的垂体IGF-1 mRNA表达的下降;CRFR1拮抗剂可以阻断低氧诱导的垂体IGF-1 mRNA表达的下降。　　4.急性低氧呈低氧时间相关地（7km，1，4和8h）增加大鼠皮层和血液白细胞TNF-α，IL-1β和IL-6 mRNA的表达。　　5.NF-κB拮抗剂阻断了低氧诱导的血液白细胞TNF-α，IL-1β和IL-6 mRNA表达的增加;CRFR1拮抗剂阻断了由低氧诱导的IL-1β和IL-6 mRNA表达的增加，但没有影响TNF-αmRNA表达的增加。　　6.在C57小鼠海马中，随年龄发育， IGFBP2，CRFR1和IGF-1R mRNA表达水平降低，而CRF，SPAR和NR-2B mRNA的表达无明显变化;在IGFBP2KO的小鼠中，与正常小鼠比较， IGFBP2，CRF，CRFR1，IGF-1R，SPAR和NR-2B的mRNA的表达量都显著的下降，但不同发育阶段无明显差异;在C57小鼠皮层中，随年龄发育，IGFBP2，CRF和NR-2B mRNA表达水平降低，而SPAR和IGF-1R mRNA表达上升，CRFR1 mRNA表达水平无明显变化;在IGFBP2KO的小鼠中，与正常小鼠比较， IGFBP2，IGF-1R，SPAR和NR-2B的mRNA的表达量都显著的下降，CRF的mRNA的表达量随年龄发育下降，CRFR1 mRNA表达水平无明显变化。正常小鼠海马组织的IGFBP2蛋白随年龄发育增加。　　7.在AtT-20细胞系中，常氧下CRF显著降低CRFR1mRNA表达，升高IGF-1R的mRNA表达，AP-1拮抗剂可以阻断CRF引起的CRFR1基因表达的下降，不影响IGF-1R基因表达;NF-κB拮抗剂不能阻断CRF引起的CRFR1基因表达的下降，也不能阻断CRF引起的IGF-1R基因表达的上升。低氧24h，CRF进一步升高了CRFR1和IGF-1R的mRNA的表达，AP-1拮抗剂不能阻断CRF引起的CRFR1和IGF-1R的基因表达的上升;但NF-κB拮抗剂可以阻断CRF引起的CRFR1和IGF-1R的基因表达的上升。　　小结:　　急性低氧垂体CRFR1和IGF-1 mRNA表达显著下降，而CRF和IGF-1R mRNA表达显著上升。　　急性低氧显著增加皮层和血液白细胞TNF-α，IL-1β和IL-6 mRNA的表达，CRFR1和NF-κB参与其基因表达的调节。　　不同发育年龄小鼠CRF和IGF家族具有不同的表达模式，IGFBP2在海马神经元的发育中可能起重要作用。　　在常氧下，AP-1起负调节作用调控CRFR1基因的转录;在低氧下，NF-κB起正调节作用调控CRFR1基因的转录。