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目的:通过检测自噬相关蛋白Beclin-1及p62在非小细胞肺癌细胞株及非小细胞肺癌患者组织中的表达情况,探讨Beclin-1及p62的表达与肺癌患者临床病理学指标的相关性及其作为一种新的肿瘤预后标志物在肺癌预后判断中的价值。方法:1.采用蛋白印迹技术(Western Blot)及免疫荧光染色法检测Beclin-1及p62蛋白在非小细胞肺癌细胞株A549、H1299、HCC827中的表达情况;2.收集苏州大学第二临床医学院胸外科2006年10月-2009年12月期间手术切除的非小细胞肺癌患者肿瘤组织128例。肺癌组织标本经4%多聚甲醛固定,并予石蜡包埋,制作组织芯片。采用免疫组织化学染色法检测128例肺癌组织中Beclin-1及p62蛋白的表达和分布。3.分析肺癌组织中Beclin-1及p62蛋白的表达活性与患者临床病理特征的相关性,探讨Beclin-1及p62蛋白的表达与肺癌患者预后的关系。结果:1.Western Blot结果显示,Beclin-1及p62蛋白在非小细胞肺癌A549、H1299及HCC827细胞株中均有表达;细胞免疫荧光染色法可观察到Beclin-1及p62蛋白主要分布在细胞质中。2.免疫组织化学染色结果显示:肺癌组织中Beclin-1及p62蛋白主要表达于肺癌细胞的细胞质中,其中Beclin-1高表达率为42.31%(44/104),p62高表达率为49.03%(51/104)。Beclin-1和p62蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平呈负相关(P=0.001)。Beclin-1蛋白的表达活性与肺癌患者的性别(P=0.007)、吸烟指数(P=0.035)、肿瘤分化程度(P=0.01)及有无淋巴结转移(P=0.000)相关,而与患者年龄、病理类型、有无COPD病史、TNM分期及CEA水平等无明显的相关性(P>0.05)。p62蛋白的表达则与TNM分期(P=0.029)及有无淋巴结转移(P=0.011)相关,与性别、年龄、吸烟指数、有无COPD病史、病理类型、肿瘤分化程度及CEA水平等无相关性(P>0.05)。3.生存分析结果显示:单因素Cox回归分析结果提示Beclin-1蛋白的低表达及p62蛋白的高表达与非小细胞肺癌患者的差预后有显著的相关性,差异具有统计学意义(P<0.001),且既往有COPD病史及TNM分期高的患者预后亦差(P=0.014,P=0.000)。多因素Cox回归分析结果显示Beclin-1蛋白的低表达、p62蛋白的高表达及TNM高分期均可作为非小细胞肺癌患者预后差的独立标记物(P=0.037,P<0.001,P=0.000)。结论:1.自噬相关蛋白Beclin-1及p62主要表达于非小细胞肺癌细胞的细胞质中,且Beclin-1和p62蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平呈负相关。2.肺癌组织中Beclin-1蛋白的表达与肺癌患者的性别及吸烟指数相关,提示肺部炎症反应可能诱导自噬的增强;其与肿瘤分化程度及有无淋巴结转移的相关性,提示Beclin-1与肺癌发展密切相关。p62蛋白的表达与TNM分期及有无淋巴结转移相关,提示p62也参与了肿瘤的进展过程。3.肺癌组织中Beclin-1及p62蛋白的表达可作为非小细胞肺癌独立的预后标记物,调节自噬相关蛋白的活性有希望成为未来肺癌个体化治疗的新靶点。