烟草陈化过程中细菌组成的动态变化及纤维素降解菌群的分离

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本文通过PCR-DGGE技术分析了陈化过程中烟叶表面微生物的组成。烟叶由上海烟草集团提供,包括云南文山C/S挑、云南文山B22、云南文山X21、河南C/S挑、河南B22、福建C/S挑、福建B22和福建X21八个等级,试图通过分析夏季(2010年5月-2010年10月)和长期陈化(陈化时间分别为3、6、12和24-36个月)过程中微生物组成的变化,研究高温、不同产地和不同等级的烟叶对陈化过程烟叶表面细菌组成的影响,并探索利用微生物指标建立烟草陈化进程的评价指标的可能性。研究结果显示,不论在夏季还是在长期的陈化过程中,烟叶表面微生物的组成变化都没有表现出明显的规律。我们首次从陈化烟叶中分离到具有降解纤维素活性的菌群,16S rDNA片段的PCR-DGGE(变形梯度凝.胶电泳)分析显示,菌群主要由5种细菌组成。菌群在接种后快速进入对数期,在第3天OD600nm达到最大,pH在接种后逐渐升高,在第8天达到最大值。20℃时菌群纤维素酶活很低,随着温度升高酶活升高,在60℃时纤维素酶活达到最高值,继续升高温度则酶活下降。pH从3升高到8时,菌群纤维素酶活不断增大,pH8的时候酶活达到最大,当pH继续升高到9时则酶活下降。菌群对烟叶、滤纸和烟梗中的纤维素都有降解作用,在以烟叶作为纤维素材料培养菌群时,纤维素酶活明显高于滤纸和烟梗。本文的结果显示:陈化过程中微生物可能对烟叶纤维素有降解作用,从而影响烟叶的陈化效果;可以利用分离到的菌群在烟叶发酵或者烟梗发酵中降解纤维素,改善烟叶或者烟梗的品质。
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