趋化因子SDF-1趋化作用的实验研究

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目的研究趋化因子SDF-1α在体内外对原代培养的骨髓间质干细胞、星形胶质细胞和N9 小胶质细胞系以及分离的中性粒细胞的趋化作用,从而探讨脑损伤和细胞移植时SDF-1α在细胞迁移中的可能机制。方法体外实验利用SDF-1α作为趋化因子加入到48孔微迁移板下室,把上述四种细胞加入到上室,抗体阻断实验把这四种细胞与抗CXCR4 多抗共孵育后加入到上室,观察细胞迁移,计算细胞的迁移指数。同时用RT-PCR 方法观察N9 小胶质细胞CXCR4 基因表达的情况。体内实验采用大鼠大脑中动脉线栓模型,把骨髓间质干细胞、中性粒细胞以及N9 小胶质细胞与抗CXCR4 多抗共孵育后的这3 种细胞分别通过大鼠尾静脉移植入体内,脑组织切片后荧光显微镜下观察脑损伤部位植入细胞的趋化情况。结果体外实验时,SDF-1α作用后,骨髓间质干细胞、N9 小胶质细胞和中性粒细胞跨膜迁移的数目较对照组明显增多,而星形胶质细胞迁移的数目未见明显变化。抗CXCR4 多抗孵育后骨髓间质干细胞、N9 小胶质细胞和中性粒细胞跨膜迁移的数目则明显减少。RT-PCR 方法证实在正常情况下N9 小胶质细胞有明显的CXCR4 表达。体内实验时,有较多的骨髓间质干细胞、N9 小胶质细胞和中性粒细胞迁移到病灶部位,而空白对照组未见到迁移的细胞,阴性对照组仅见个别迁移的细胞。结论趋化因子SDF-1α能通过受体CXCR4 发挥对骨髓间质干细胞、N9 小胶质细胞和中性粒细胞的趋化作用,对星形胶质细胞没有趋化作用。在体内,损伤的脑组织可能主要通过分泌SDF-1α增多作用于CXCR4 从而对炎症细胞、小胶质细胞或移植的骨髓间质干细胞发挥趋化作用。
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