水溶性聚合物配体修饰磁性Fe3O4纳米颗粒的制备及其作为磁共振成像造影剂的研究

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四氧化三铁(Fe3O4)磁性纳米颗粒由于具有超顺磁性、低毒性等优异的性能,在磁共振成像、磁分离、生物标记、药物载体等生物医学和生物工程领域有着广泛的应用前景。然而Fe3O4纳米颗粒具有较高的比表面积和比表面能,容易发生团聚,导致应用受到了极大的限制。选择含官能基团(羟基、羧基、氨基、硫醇)的聚合物作为配体进行修饰或稳定,则可以制备出颗粒尺寸均一、近单分散、稳定、水溶性的磁性纳米颗粒。本文设计采用含有羧基官能团的交替聚合物P(MA-alt-VAc)和带有富电子的吡咯烷酮基团的PTMP-PVP聚合物制备得到磁性Fe3O4纳米颗粒,并表征了其形貌、粒径、结构、稳定性、细胞毒性等,并考察了其作为造影剂在磁共振成像领域的应用。主要内容如下:(1)以乙酸丁酯作溶剂,过氧化二苯甲酰(BPO)作引发剂,马来酸酐(MA)和醋酸乙烯酯(VAc)作为反应单体合成了含羧基的水溶性的交替聚合物P(MA-alt-VAc)。同样地,利用高温共沉淀法合成了磁性四氧化三铁纳米颗粒,并通过改变聚合物配体浓度、加入链转移剂PTMP的量以及改变MA与VAc的单体摩尔比例来调控所合成的纳米颗粒的尺寸及形貌。通过TEM、DLS、FTIR、XRD、TGA、VSM等测试来表征该纳米颗粒的形貌、尺寸、化学组成及结构、磁性等多方面性质。此外,测试了单体摩尔比例(MA/VAc)为0.5/1时的纳米颗粒的细胞毒性,结果证明该磁性纳米颗粒有着良好的生物相容性。体外弛豫结果表明,随着铁离子浓度的增加,体外弛豫信号会负向增强。其r1和r2值分别是7.54 mM-1s-1和24.81 mM-1s-1,有成为T2造影剂的潜力。(2)以乙醇(EtOH)为溶剂、季戊四醇-四(3-巯基丙酸酯)(PTMP)作链转移剂、N-乙烯基-2-吡咯烷酮(VP)为反应单体,2-2偶氮二异丁氰(AIBN)为引发剂,通过自由基聚合得到硫醚封端的水溶性聚合物配体——季戊四醇-四(3-巯基丙酸酯)-聚乙烯基吡咯烷酮(PTMP-PVP)。随后,利用铁前驱体溶液的高温共沉淀法制备得到磁性四氧化三铁纳米颗粒(PTMP-PVP@Fe3O4)。通过透射电镜(TEM)、动态光散射粒度仪(DLS)、傅里叶红外(FTIR)、X射线衍射(XRD)、热重分析(TGA)表征了PTMP-PVP@Fe3O4纳米颗粒的形貌、粒径及其分布、化学组成和晶体结构等。利用不同浓度的盐溶液和血清溶液测试了其稳定性能。通过CCK-8的实验,测试了该纳米颗粒的细胞毒性,结果表明该磁性氧化铁纳米颗粒对DC2.4正常细胞以及MCF-7肿瘤细胞均有良好的生物相容性。体外弛豫测试其纵向弛豫率(r1)和横向弛豫率(r2)值分别为5.44 mM-1s-1和231.06m M-1s-1。小鼠体内磁共振成像(MRI)以及体内组织学分布结果表明,该磁性纳米颗粒在小鼠肝部位的成像信号有着明显的先增强再减弱的趋势,可作为T2造影剂,同时具有生物安全性,不会引起炎症毒性。
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