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口蹄疫（foot-and-mouth disease, FMD）严重地影响着世界各国畜牧业的发展，目前对该病的控制，主要采取诊断检测与疫苗免疫相结合的方法。在FMD的诊断技术中，最有效、最经济的方法是酶联免疫吸附试验(ELISA)。传统的ELISA方法是以全病毒作为抗原检测血清抗体，但在全病毒的生产过程中存在着病毒扩散的危险，因此，将口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus,FMDV）结构蛋白基因进行体外表达，将纯化的蛋白作为检测方法的抗原是一种更安全、更有效的方法。另外，将纯化的蛋白免疫动物，诱导动物机体产生抗体，可用于疫苗的研制，为FMD亚单位疫苗的研制奠定了基础。本研究根据GenBank数据库中公布的猪O型FMDV基因序列(JN998085.1)合成了FMDV结构蛋白前体蛋白P1基因。以上海生工生物工程股份有限公司合成的pUC57-P1质粒为模板，扩增得到了VP0、VP1、VP3基因，利用SUMO融合表达载体在大肠埃希氏菌BL21(DE3) plysS中表达，分别获得了45ku、35ku和35ku的融合蛋白SUMO-VP0、SUMO-VP1及SUMO-VP3。将融合蛋白进行复性及纯化处理，在SUMO-VP3蛋白纯化过程中，使用SUMO Protease1进行酶切处理，去除SUMO融合标签，得到VP3蛋白。应用复性且纯化的SUMO-VP0、SUMO-VP1、SUMO-VP3及VP3蛋白建立了间接ELISA方法。结果表明，建立的SUMO-VP0-ELISA、SUMO-VP1-ELISA、SUMO-VP3-ELISA及VP3-ELISA方法均具有良好的反应原性，SUMO-VP0、SUMO-VP1、SUMO-VP3及VP3蛋白均可作为建立检测FMDV血清抗体间接ELISA方法的候选蛋白。SUMO-VP1-ELISA与SUMO-VP0-ELISA和SUMO-VP3-ELISA方法相比，VP3-ELISA与SUMO-VP3-ELISA方法相比，阴、阳性血清OD450值相差较大，P/N比值较大。检测血清样品时，SUMO-VP0-ELISA与O-LPBE、Asia1-LPBE的符合样品总数相符，初步说明SUMO-VP0蛋白可作为建立O型、Asia1型FMDV血清抗体检测方法的候选蛋白。将复性且纯化的SUMO-VP0、SUMO-VP1、SUMO-VP3蛋白免疫豚鼠，检测FMDV抗体水平。结果表明，SUMO-VP0、SUMO-VP1及SUMO-VP3蛋白均具有良好的免疫原性，均可诱导豚鼠机体产生特异性抗体，且SUMO-VP0、SUMO-VP1、SUMO-VP3蛋白混合免疫的豚鼠血清抗体水平最高。总之，原核表达的SUMO-VP0、SUMO-VP1、SUMO-VP3及VP3蛋白均具有良好的反应原性及免疫原性，为O型FMD诊断试剂及基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。