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皮肤损伤后胶原蛋白等细胞外基质的异常沉积,可形成病理性瘢痕(瘢痕疙瘩或增生性瘢痕),不仅会破坏人的体表完美,严重者往往导致功能障碍,对病理性瘢痕的防治一直是临床研究重要课题。转移生长因子β(TGFβ)是目前已知的与瘢痕过度形成关系最为密切的细胞因子。目前,关于病理性瘢痕的基因治疗的研究已经开展了很多,但是,随着RNA干扰(RNA interference)现象的被发现,开启了基因治疗的新方法。应用RNA干扰技术治疗瘢痕疙瘩的研究,国内外报道的很少。本课题在荧光蛋白腺病毒载体(Ad eGFP)的监视下,构建了含人转化生长因子β1短发夹RNA(TGF-β1 shRNA)的重组腺病毒载体(rAd TGF-β1);体外原代培养了瘢痕疙瘩的成纤维细胞(靶细胞);将重组腺病毒载体转染靶细胞后,应用流式细胞术检测了细胞周期的变化,应用MTT方法检测了细胞增殖情况,应用RT-PCR方法,半定量地检测了转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA水平的变化,应用Western blot方法,半定量地检测了转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白质水平的变化。本研究结果:成功构建了含人转化生长因子β1短发夹RNA(TGF-β1 shRNA)的重组腺病毒;转染后瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和生长受到明显阻滞;腺病毒Ad TGFβ抑制了TGF-β1 mRNA的表达;腺病毒Ad TGFβ抑制了TGF-β1的分泌。腺病毒Ad TGFβ2抑制TGF-β1的效果优于Ad TGFβ3。实验结果说明:腺病毒介导的TGF-β1 shRNA能够在体外抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖及抑制TGF-β1的分泌。RNA二级结构带有茎结构的靶序列抑制效果优于带有一个环结构的靶序列。