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目的对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,简称MALDI-TOF MS)联合VITEK2全自动微生物鉴定仪(简称VITEK2)在血液及无菌体液培养快速鉴定及药敏实验中的应用进行研究,建立合适的血液及无菌体液培养阳性标本的快速报告流程,为临床医生快速准确的选择抗菌药物提供可靠的依据。方法选取唐山市工人医院检验科微生物室2019年2月到2020年2月的单一细菌感染的血液及无菌体液培养报阳瓶300例,涂片革兰染色镜检后,根据镜检结果转种合适的固体培养基,37℃培养4小时长出菌膜,进行MALDI-TOF MS鉴定和VITEK2鉴定及药敏试验;培养18~24小时后的纯菌落进行MALDI-TOF MS鉴定和VITEK2鉴定及药敏试验。结果1本实验收集了300例单一细菌感染的血液及无菌体液培养阳性标本,其中肠杆菌146株,非发酵菌34株,葡萄球菌67株,肠球菌27株,链球菌16株,其它少见菌10株。2以菌落MALDI-TOF MS鉴定结果为最终结果,181株革兰阴性菌的菌膜鉴定结果中,MALDI-TOF MS能将181(100%)株鉴定到属水平,174(96%)株鉴定到种水平,VITEK2能将174(96%)株鉴定到种水平;101株革兰阳性菌的菌膜鉴定结果中,MALDI-TOF MS能将100(99%)株鉴定到属水平,96(95%)株鉴定到种水平,VITEK2能将92(91%)株鉴定到种水平;菌膜MALDI-TOF MS鉴定与菌落MALDI-TOF MS鉴定符合率进行比较,差异无统计学意义(P>0.05);菌膜MALDI-TOF MS鉴定与菌膜VITEK2鉴定符合率进行比较,差异有统计学意义(P<0.05);菌膜VITEK2鉴定和菌落VITEK2的鉴定符合率进行比较,差异无统计学意义(P>0.05);300例单一菌感染的样本中,有18株细菌生长较为缓慢,没有长出菌膜,无法用菌膜进行鉴定,但只占全部样本的6%,多为革兰阳性链球菌和革兰阳性杆菌。3选取263株常见细菌,用VITEK2进行菌膜和菌落常规药敏鉴定,170株革兰阴性杆菌菌膜药敏实验与常规菌落药敏实验的总符合率为98%(2175/2215),94株革兰阳性菌菌膜药敏实验与常规菌落药敏实验的总符合率为99%(1337/1355)。两种药敏实验结果不一致的以E-test条方法为金标准,对二者进行比较,革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌中,差异均无统计学意义(P>0.05)。4菌膜MALDI-TOF MS联合VITEK2快速鉴定和药敏实验结果回报平均时间为(14.48±1.94)h,传统流程结果回报平均时间为(32.92±3.32)h,二者进行比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1 MALDI-TOF MS的菌膜鉴定可以用于血液及无菌体液培养的快速鉴定。同时,在没有质谱仪的实验室VITEK2的菌膜鉴定也可以用于血液及无菌体液培养的快速鉴定。2用菌膜进行VITEK2的快速药敏实验,可以用于血液及无菌体液培养的快速药敏实验。3 MALDI-TOF MS联合VITEK2的菌膜快速鉴定和药敏实验应用于血液及无菌体液快速鉴定流程,结果回报时间明显缩短,是一种快速,准确,有效的方法,适合在临床微生物检验工作中推广应用。图3幅;表10个;参110篇。