青光眼术后结膜纤维化的基础及临床研究

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第一部分 血小板反应蛋白-1对小梁切除术预后的影响目的:观察原发性闭角型青光眼(primary angle-closure glaucoma,PACG)患者房水中血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)的浓度,并探讨它与小梁切除术预后的关系。方法:纳入PACG患者小梁切除术失败的患者26例作为病例组,78例小梁切除术成功的PACG患者作为对照组。收集所有患者小梁切除术前房水,检测两组患者房水中TSP-1的浓度。采用单因素以及多因素logistic回归分析小梁切除术失败的危险因素。结果:病例组26例患者房水中TSP-1的浓度(20.67±9.79 ng/ml)明显较对照组78例(5.17±2.29ng/ml)高,差异有统计学意义(P<0.001)。Logistic回归分析显示房水中TSP-1浓度是PACG患者小梁切除术失败的独立危险因素。结论:一年随访时小梁切除术失败PACG患者房水中TSP-1的浓度明显高于小梁切除术成功的患者。房水中TSP-1浓度是小梁切除术失败的危险因素。第二部分 松弛素2抑制TGF-β1诱导的人眼Tenon’s囊成纤维细胞活化及其机制的研究目的:探讨松弛素2对人眼Tenon’s囊成纤维细胞增殖,移行以及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白合成的影响,并探讨它的可能机制。方法:在手术中取斜视患者的Tenon’s囊组织进行成纤维细胞原代培养,并分别予松弛素2(Relaxin 2),TGF-β1,TGF-β1+relaxin2或者空白对照进行干预。细胞增殖试验用CCK-8试剂盒检测,细胞移行试验采用刮痕实验检测。平滑肌动蛋白α(alpha smooth muscle actin,α-SMA),基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinases,MMP2),Collegen I,Fibronectin 以及磷酸化的Smad 的表达采用逆转录-PCR,western blot,酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)或者免疫荧光的方法来检测。结果:体外成功地培养了人眼Tenon’s囊成纤维细胞,培养的细胞形态稳定,经免疫荧光鉴定细胞波形蛋白表达阳性,角蛋白表达阴性,符合成纤维细胞特性。TGF-β1可诱导人眼Tenon’s囊成纤维细胞中α-SMA在转录水平以及蛋白水平表达均明显上调。TGF-βi诱导人眼Tenon’s囊成纤维细胞合成Collegen I以及Fibronectin等ECM蛋白增加,增加细胞的增殖以及移行,降低MMP2的表达。而relaxin2则可抑制TGF-βi诱导的细胞移行,增殖以及Collegen I和Fibronectin等ECM蛋白的合成。同时relaxin2可抑制TGF-β1诱导的磷酸化Smad表达。结论:Relaxin 2可抑制TGF-β1诱导的人眼Tenon’s囊成纤维细胞的增殖、移行以及ECM蛋白的合成。Relaxin2主要是通过Relaxin 2/TGF-β/Smad/MMP2/Collagen I与Fibronectin信号轴实现来实现这种调节作用。Relaxin2对减少滤过泡纤维化可能有帮助。
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