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大白菜起源于中国，是我国最重要的蔬菜作物之一。病毒病是影响大白菜生产的主要病害，芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）是引起该病的主要病原。大白菜TuMV抗性基因的定位克隆、功能研究及抗性机制探索对大白菜TuMV高效分子育种具有特殊重要意义。本研究以大白菜抗TuMV高代自交系BP8407和感TuMV高代自交系极早春等为实验材料，对大白菜TuMV抗性基因进行遗传、定位、克隆研究，并对该抗性基因进行功能验证及抗性机制探索，获得了以下研究结果：1、以大白菜抗TuMV高代自交系BP8407和感TuMV高代自交系极早春为亲本，构建F2群体及F2:3家系。对F2群体及F2:3家系进行TuMV C4株系人工机械磨擦接种、ELISA检测。F2群体中共239株，其中抗病植株52株，感病植株187株。经卡方检测，抗感比符合1：3，因此BP8407对TuMV C4抗性受一对隐性基因控制。2、利用混合群体分组分析法（BSA）、SSR和Indel标记技术筛选与TuMV抗性基因连锁的标记。在200对SSR标记中，筛选到一个与TuMV抗性基因连锁的标记BC84。BC84位于白菜A04染色体上的scaffold000048上。进一步在A04染色体上scaffold000048附近的145对Indel标记中筛选到与TuMV抗性基因连锁的17对Indel连锁标记。该抗性基因两侧紧密连锁的分子标记为BrID10694和BrID101309，其与抗病基因连锁距离分别为0.3和0.6cM。该隐性抗性基因位于大白菜A04染色体上的scaffold000060或者scaffold000104上，将其命名为retr02。3、根据白菜参考基因组信息及植物对病毒的隐性抗性机制，对retr02定位目标区域内的基因进行分析，筛选到retr02的侯选基因Bra035393，其编码eIF（iso）4E蛋白。该基因与拟南芥TuMV隐性抗性基因lsp为共线性基因。4、根据白菜参考基因组的Bra035393序列信息，设计引物，对亲本BP8407和极早春的Bra035393的gDNA和cDNA进行克隆分析。对Bra035393的gDNA克隆测序后发现，BP8407的Bra035393与极早春的Bra035393相比存在着3个差异位点，第一个差异位点是在exon1和intron1的连接处多出一个碱基G，第二个差异位点是在intron2中多出一个碱基T，第三个差异位点是在exon3中存在着一个SNP（A/G）。对Bra035393的cDNA克隆测序后发现，极早春的Bra035393正常编码成熟的eIF（iso）4E蛋白。而BP8407的Bra035393由于exon1和intron1的连接处多出一个碱基G发生错误剪切，造成编码提前终止，编码不成熟的eIF（iso）4E蛋白。5、对retr02（BP8407Bra035393）和Retr02（极早春Bra035393）构建原核表达载体（pET-32a），进行蛋白诱导分析，进一步验证出Retr02编码正常的eIF（iso）4E蛋白，而retr02编码的蛋白长度大大缩短，其为不成熟的eIF（iso）4E蛋白。通过酵母双杂互作分析得出，Retr02编码的完整的eIF（iso）4E蛋白可以与TuMV C4VPg蛋白互作，而retr02编码的eIF（iso）4E蛋白不能与TuMV C4VPg蛋白互作。证实retr02编码的不成熟的eIF（iso）4E蛋白，丧失与TuMV C4VPg互作的能力，从而使80122对TuMV C4产生抗性。综上所述，本研究定位、克隆了大白菜TuMV隐性抗性基因retr02，并明确了retr02的抗性机制，为大白菜抗TuMV高效分子育种奠定了基础。