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目的:瘢痕疙瘩(Keloid)是临床上继发于皮肤真皮损伤后,以瘢痕疙瘩组织中成纤维细胞异常增殖、细胞外基质(尤其是胶原)大量沉积为特征的疾病。目前研究发现,miR-21在纤维化的心肌、肾、肺等组织中表达显著增加,促进的纤维化的发生。先前microRNA芯片研究结果表明,miR-21在瘢痕疙瘩组织中高表达。本课题主要研究miR-21异常表达是否影响胶原的合成,进而导致瘢痕疙瘩形成,以及miR-21是否是治疗瘢痕疙瘩的潜在靶点。方法1.应用Real-time PCR比较正常皮肤和瘢痕疙瘩组织及两者分离的成纤维细胞中miR-21、Smad7、Col1a1和Col3a1的表达。2.分别转染miR-21的模拟物和抑制物,检测Smad7,Col1a1以及Col3a1表达;应用结晶紫染色检测细胞增殖能力。3.进行外源性TGF-β1诱导,检测TGF-β1对成纤维细胞miR-21表达的影响。检测TGF-β1、miR-21模拟物或抑制剂处理下Col1a1、Col3a1以及Smad7表达。4.在成纤维细胞中转染Smad 7 siRNA,检测纤维化指标的表达。5.建立瘢痕疙瘩组织块移植裸鼠模型,探索miR-21抑制剂对体内瘢痕疙瘩生长的影响。结果:1.瘢痕疙瘩组织和分离的成纤维细胞中miR-21,Col1A1,Col3A1表达水平高;Smad7的表达低。2.正常成纤维细胞转染miR-21模拟物后,Smad7表达降低,Col1A1,Col3A1表达显著增加。瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-21抑制剂后,作用反之。正常成纤维细胞转染miR-21mimic后,成纤维细胞增殖能力显著增加,瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-21抑制剂后,作用反之。3.TGF-β1诱导miR-21、Col1A1,Col 3A1表达增加,Smad7表达降低;转染miR-21模拟物作用相同,而转染miR-21抑制剂作用相反。4.相对于对照组,正常成纤维细胞中转染Smad 7 siRNA后,Col1a1和Col3a1蛋白和核酸水平表达显著增加。5.应用miR-21抑制剂降低裸鼠模型中瘢痕疙瘩组织块的体积和质量。结论:1、瘢痕疙瘩miR-21高表达降低Smad7的表达,增加Col1A1,Col 3A1的表达;miR-21能促进成纤维细胞的增殖能力。2、TGF-β1促进miR-21的表达,且TGF-β1与miR-21都能促进Col1A1,Col 3A1的表达,降低Smad7的表达。3、miR-21inhibitor处理裸鼠皮下移植瘢痕疙瘩能显著降低移植的瘢痕疙瘩体积和质量。