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目的根据药物靶向递送系统(DDS)理论,将叶酸与PEG共聚连接,制备以FA为导向物的复合脂质体,通过体外实验,探讨靶向药物递送系统(TDDS)在实现靶向释药方面的功能,以及复合脂质体在逆转MDR方面的作用。方法本实验依据上述思路,选择临床常用抗肿瘤药物阿霉素(Doxorubicin,DOX)及抑制剂维拉帕米(Verapamil,VER)为模型,以叶酸靶向脂质体作为载体,叶酸高表达的耐药细胞株MCF-7/DOX为模型细胞,进行MTT实验,考察复合脂质体的靶向性及逆转肿瘤MDR效果。结果本文合成了膜材FA-PEG-DSPE,经TLC鉴定纯度高。采用(NH4)2SO4梯度法制备了叶酸靶向复合脂质体(Folate-targeted liposome encapuslating DOX and VER,FLDV),首先制备叶酸靶向阿霉素脂质体(Folate-targeted liposome encapuslating DOX,FLD),然后再载VER。通过正交实验,筛选出制备FLD脂质体的最佳处方:药脂比1:20,(NH4)2SO4浓度250mmol/l,孵育温度为60℃,孵育时间30min。载VER过程中最适pH值8.5,药脂比1:40,孵育温度为60℃,孵育时间30min,以最佳处方制备的FLDV脂质体,DOX包封率为92.1%,VER包封率为70.2%。采用高效液相色谱法测定了复合脂质体中DOX和VER的含量及包封率。实验结果表明,方法灵敏度高、专属性强,可满足分析要求。用透射电镜观察脂质体粒径分布均匀,平均粒径为80nm左右。将脂质体分别在4℃和25℃下充氮密闭放置1个月,以均匀度、包封率、TLC斑点为指标考察其稳定性。结果显示,脂质体于4℃贮存时,以上指标无显著变化,脂质体比较稳定。复合脂质体的体外释药实验表明,药物经包封后具有很好的缓释效果。脂质体的细胞毒性实验结果显示,对MCF-7/DOX的IC50值:FLDV<FLD<FDFV<LDV<FD, FLDV的逆转MDR效果最强,逆转倍数是FLD的7倍,是LDV的70倍。结论FLDV能利用靶向和抑制P-gp表达双重作用达到提高逆转MDR效果。