过敏性紫癜发病中NF-κB对树突状细胞的调控与T辅助细胞分化失衡的关系

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第一部分过敏性紫癜发病中树突状细胞与T辅助细胞分化失衡的关系目的:探讨树突状细胞(DC)调控信号的异常与过敏性紫癜(HSP)及过敏性紫癜肾炎(HSPN)病人发病中T辅助细胞分化失衡的关系。方法:分别采用散射比浊法、ELISA和流式细胞技术,检测HSP及HSPN患儿血浆中免疫球蛋白、血浆IL-4、INF-γ和DC培养上清IL-12、IL-10水平及DC表面CD86、CD80、CD83、HLA-DR、CD-209的表达情况。结果:与对照组比较,HSP及HSPN组患儿:血浆免疫球蛋白IgA及IgE水平升高;血浆中Th2类细胞因子IL-4升高,Th1类细胞因子INF-γ降低;DC培养上清中IL-10升高,IL-12降低;DC表达CD86、CD83、HLA-DR水平升高,表达CD80水平降低。CD-209在对照组、HSP及HSPN之间差异无统计学意义。结论:DC的抗原特异性信号、协同刺激信号和分化或极化信号三种调控信号的异常,与HSP及HSPN患儿Th1/Th2失衡、免疫球蛋白合成异常密切相关。第二部分NF-κB—DC—Th细胞信号通路在过敏性紫癜免疫发病中的作用目的:了解NF-ΚB—DC—Th细胞信号通路失衡在HSP及HSPN发病中的作用。方法:分别采用ELISA、流式细胞技术、RT-PCR和细胞免疫化学方法,检测对照组、HSP和HSPN患儿未加入NF-ΚB抑制剂BAY-11-7082和加入抑制剂后, DC培养上清IL-12、IL-10水平;DC表面CD86、CD80、CD83、HLA-DR、CD-209的表达;DC内NF-κB亚型p50、p65 mRNA表达量和DC内NF-κB活化情况。结果:与对照组比较,HSP组和HSPN组: DC培养上清中IL-10升高,IL-12降低;CD86、CD83、HLA-DR升高,CD80降低;细胞内NF-κB p50、p65 mRNA表达量也升高; NF-κB活化表达数量增多,但HSP与HSPN以上检测指标无显著差异。加入NF-κB抑制剂后以上各项异常指标可逆转,且逆转后与对照组比较无显著差异。结论:HSP发病与DC异常调控Th1/Th2细胞失衡密切相关,NF-κB是DC免疫功能的关键性调控基因,抑制NF-κB的活化是阻断DC功能和依赖于T细胞免疫反应的一个有效靶点,将成为早期治疗HSP的一条有效途径。
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