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指状青霉菌(Penicillium digitatum)引起的柑橘绿霉病是最重要的柑橘采后病害之一,目前对指状青霉菌的防治仍然以杀菌剂为主。本文研究了脱甲基抑制剂咪鲜胺和苯胺基嘧啶类杀菌剂嘧霉胺对指状青霉菌的抑制作用以及指状青霉菌对这两种杀菌剂的抗药性机理,这些研究对科学利用咪鲜胺和嘧霉胺防治指状青霉菌具有重要的理论意义和实践指导作用。通过测定咪鲜胺对2017年采集的129株指状青霉菌的抑制中浓度(EC50),建立了指状青霉菌对咪鲜胺的相对敏感性基线。根据EC50值的分布,把EC50<0.050μg/m L的112株指状青霉菌作为相对敏感菌株,其平均EC50值为0.0090±0.0054μg/m L(SD),将EC50>0.050μg/m L的17株指状青霉菌认定为敏感性下降的菌株,其平均EC50值为0.108±0.095μg/m L(SD)。0.005和0.01μg/m L的咪鲜胺均可降低菌丝细胞膜通透性,破坏孢子细胞膜的完整性,降低菌丝体内麦角甾醇的含量,但对菌丝细胞壁中甘露聚糖含量没有显著影响。与敏感菌株相比,咪鲜胺抗性菌株HBYC-A29R(EC50=5.68μg/m L)的CYP51B基因有G405S(GGT405AGT)突变;另一个抗性菌株SCMS-39R(EC50=3.97μg/m L)的CYP51B基因有G389C(GGT389TGT)和Y390S(TAT390TCT)突变。抗性菌株CYP51B基因上游启动子区域有199 bp的插入序列,可能是导致抗性菌株CYP51B基因相对表达量比敏感菌株显著升高的主要原因。建立了嘧霉胺对指状青霉菌的敏感性基线。根据135株EC50值的分布,把EC50<0.30μg/m L的132株指状青霉菌作为敏感菌株,其平均EC50值为0.1343±0.0342μg/m L(SD),EC50>0.30μg/m L的3株指状青霉菌认定为敏感性下降的菌株,EC50值分别为0.318、0.363和0.436μg/m L。0.1和0.2μg/m L的嘧霉胺可以显著降低菌丝中纤维素酶和果胶酶活性,降低菌丝中甲硫氨酸的含量。PDA中添加甲硫氨酸可以降低0.1和0.2μg/m L的嘧霉胺对敏感菌株的毒力。室内药剂诱导敏感菌株第4代就出现了高抗菌株(RF>1000)。适合度研究表明与敏感菌株相比,嘧霉胺抗性菌株致病力减弱,耐过氧化氢能力增强。嘧霉胺和咪鲜胺没有交互抗性(r=0.377,P=0.123)。抗性机制研究表明嘧霉胺敏感和其抗性突变体的胱硫醚γ合成酶基因(CGS1和CGS2)的编码区序列没有差异。与敏感菌株相比,抗性突变体CGS1基因表达量下降了51.34%(P=0.235),CGS2基因表达量下降了62.76%(P=0.042),这表明指状青霉菌对嘧霉胺产生抗性可能与胱硫醚γ合成酶(CGS)基因的表达下调有关。