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目的:探究胃癌来源的外泌体exosomes通过对巨噬细胞的调节促进胃癌发展的作用及机制,为揭示exosomes通过作用巨噬细胞改变胃癌微环境促进胃癌的发展提供理论基础与实验支撑。方法:运用超速离心法从正常胃上皮细胞(GES-1)以及胃癌细胞(MGC-803,SGC-7901)培养上清中提取exosomes,并通过透射电镜、Nanosight技术及Western-blot分析分别对exosomes的形态、数目与表面标记进行鉴定;运用流式细胞成像技术及高内涵荧光显微镜观察exosomes被巨噬细胞内化的现象;通过细胞划痕实验,细胞迁移实验,细胞克隆实验,细胞侵袭实验及细胞凋亡检测探究exosomes作用的巨噬细胞上清对胃癌细胞的影响;Western blot检测exosomes作用后的单核巨噬细胞中NF-κB通路的活化情况;使用小分子抑制剂Bay11-7082阻断巨噬细胞中NF-κB通路的活化;q RT-PCR与ELISA检测exosomes作用后的单核巨噬细胞炎症因子的表达变化。结果:从胃癌上皮细胞株及胃癌细胞株培养上清中成功分离出的exosomes呈现50-100纳米左右的囊泡状,粒子浓度约为1.0×1011/ml到2.5×1011/ml,exosomes表面蛋白标记CD9、CD81为阳性。流式成像检测与高内涵荧光显微镜检查发现,巨噬细胞能够成功地吞噬荧光标记的胃癌细胞来源exosomes。胃癌细胞经MGC-803以及SGC-7901来源的exosomes处理的巨噬细胞上清作用后,其迁移能力与细胞克隆形成能力较对照组明显增强;胃癌细胞来源的exosomes处理巨噬细胞后其上清具有促进MGC-803以及SGC-7901细胞侵袭的功能;而经胃癌细胞来源的exosomes处理的巨噬细胞上清对胃癌细胞的凋亡能力改变无明显作用。胃癌细胞MGC-803以及SGC-7901细胞来源的exosomes作用巨噬细胞后NF-κB通路活化,P-P65表达上调,定量以及ELISA检测IL-6、TNF-α、CCL2基因以及蛋白水平的表达与对照组相比明显上调。使用NF-κB通路抑制剂Bay11-7082预处理THP-1细胞后,胃癌exosomes对单核细胞NF-κB通路活化能力受到抑制,炎症因子IL-6、TNF-α、CCL2的表达亦明显下调,其上清对胃癌的生物学功能无明显改变。应用人外周血巨噬细胞的实验表明,MGC-803来源的exosomes能够活化NF-κB通路,上调炎症因子的表达,促进胃癌细胞的迁移能力,细胞克隆能力与细胞的侵袭能力。结论:胃癌来源的exosomes通过作用肿瘤微环境中的巨噬细胞促进胃癌的进程。本研究揭示了exosomes在胃癌微环境中的新作用,为全面认识exosomes在胃癌进程中的作用提供了新的证据,同时也为胃癌的临床治疗提供了新的治疗思路。