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对猪链球菌7型菌株的特征——核糖型(ribotyping)、脉冲场凝胶电泳(PFGE)型、耐药性及其所携带的抗性决定簇进行了研究。并采用抑制性差减杂交(SSH)的方法对2型毒力菌株所携带的差异基因序列进行了研究,发现了5个新的可能的毒力基因。并对这5个片段在2型菌株中的分布进行了研究。 1 对103株猪链球菌7型菌株的核糖型进行了研究。共发现了41种不同的核糖型,并且其中有18种在103株细菌中是重复出现的。其中以核糖型2为主,其占所有被分析菌株的23%(24/103)。根据77%的同源性,38种核糖型图式可以被划分为A及B两个主要的群落,3个独特的核糖型图式不能被划分于任何一个主要的群落,且菌株的核糖型图式与其的临床起源(如脑膜炎、肺炎)之间未发现很明显的关系。 2 用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法,对54株7型猪链球菌(包括24株核糖型2分离株)进行了遗传多样性分析,共发现了50种PFGE型。可被划分为A和B两个群落,群落B可以被进一步划分为三个亚群(B1、B2和B3)。属于同一核糖型的不同菌株,可以通过PFGE进一步区分开来。经分析后发现,大多数的脑或脑膜分离株都属于B群,从脾中分离的所有菌株均归属于B1亚群,但是所有的肺分离株未显示PFGE特异性。结果表明,在菌株的临床起源(如脑膜炎、肺炎)与PFGE型之间无明显的联系。 3 测定了103株7型丹麦分离株对13种抗生素的耐药性。结果发现,40.78%(42/103)的细菌对红霉素具有抗性,而24.27%(25/103)及28.16%(29/103)的细菌分别对四环素和链霉素具有抗性。此外,大量的分离株(66株)表现为多重抗性。猪链球菌7型菌株对头孢噻呋、环丙沙星、氟苯尼考、青霉素、甲氧氨苄嘧啶及甲氧氨苄嘧啶+磺胺甲基异嗯唑敏感。此外,用PCR方法,对42株红霉素抗性菌株和29株四环素抗性菌株所携带的5种抗性决定簇进行了检测。发现erm(B)是7型菌株的主要的红霉素抗性决定簇,而 tetM)及tet ()是7型菌株的主要的四环素抗性决定簇。 4对有毒力的国内分离株HA9801株与无毒力的国外分离株12‘的核糖型进行了分型,二者分别属于Rasmussen等所报导的 1型及4型,且具有约 60%的同源性。与此同时,检测了这两株细菌对u种抗生素的耐药性,肌9801株具有链霉素、四环素和磺胺甲基异嗯哇抗性,而 12‘菌株则不具有任何抗性。对HA9801株的四环素抗性决定簇的研究表明,其携带有tet(M)抗性基因。 5对毒力株HA9801株及无毒力株12’进行了抑制性差减杂交(SSH)实验,获得了5个可能的毒力基因的片段,其功能分别是转录调节子,氨基酸通透酶,ABC转运子;表面锚定蛋白等。 6根据抑制性差减杂交(%回)所获得的5个可能的毒力基因的序列,设计了5对引物,对它们在2型菌株中的分布进行了研究。