羊膜细胞外基质和结膜细胞外基质重建结膜的实验研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengfeiyuren
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目的本实验通过将羊膜细胞外基质和结膜细胞外基质植片移植于结膜缺损区,观察两种细胞外基质(extracellular matrix,ECM)进行结膜重建的效果,探讨二者在结膜结构和功能重建中的作用,为临床治疗相关疾病提供实验依据。方法取12只家兔,每只家兔双眼均制成结膜缺损模型,随机将已制备好的羊膜ECM和结膜ECM植片分别移植于同一只家兔的左右眼结膜缺损区,隔日观察术后结膜成形情况。并将这12只家兔随机分为4组,分别于1、2、3及5周进行移植区结膜印迹细胞学检查及光镜、电镜检查。对于两种ECM移植术后杯状细胞数目的差异采用裂区设计资料的方差分析。结果1.实验中羊膜ECM组和结膜ECM组均没有发生植片溶解、脱落及感染,所有植片均成活,恢复结膜正常外观,无睑球粘连、瘢痕组织形成。2.裂隙灯检查结果羊膜ECM组于术后1~5天时植片略水肿,可透见植床血管,周围结膜轻度充血水肿;7天时植片发白、透明度下降,明显水肿;10天时植片水肿减轻,色变红;3周时移植区被周围上皮完全覆盖,水肿消失,但植片仍有小区域充血。结膜ECM组术后1~3天时植片灰白水肿、半透明;5天时植片明显苍白水肿、周围结膜充血水肿;7天时上述反应仍较明显;12天左右植片开始变透明,呈淡红色;3周时移植区充血。5周时两组移植区外观上与周围结膜相似。3.结膜印迹细胞学检查随着术后时间的延长,两组杯状细胞数目逐渐增多,结膜上皮鳞状化生程度逐渐减轻。不同时点两组比较,结膜ECM组上皮鳞状化生程度较羊膜ECM组轻、级别低,杯状细胞数目多(F=148.168;P<0.001),差异有统计学意义。4.光镜及电镜检查术后1周时结膜ECM组再生上皮基本全部覆盖植片,间质水肿,有大量中性粒细胞、淋巴细胞及单核巨噬细胞浸润;羊膜ECM组植片中央区仍裸露,间质炎性细胞少。电镜下两组上皮间均出现细胞连接。3周时结膜ECM组再生上皮层较羊膜ECM组厚,且细胞形态规则、排列整齐;5周时两组上皮细胞均为2-3层,但结膜ECM组可见较多的杯状细胞。结论1.羊膜ECM和结膜ECM均能有效重建结膜,是较理想的结膜替代物。二者比较,羊膜ECM的抗原性更低、抗炎作用更强,而结膜ECM更有利于结膜结构和功能的恢复。2.结膜印迹细胞学检查简单易行、创伤小、可短期内重复进行,能反映整个眼表上皮的病理学改变和结膜分泌功能,是一种较为实用的诊断分析眼表疾病的方法。
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