应激刺激下机体下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴激素变化的研究

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目的:探讨非外伤性应激刺激对下丘脑-垂体-肾上腺轴内分泌激素及细胞水平的影响,为临床治疗应激刺激所致内分泌紊乱提供实验依据。对象与方法:选取健康新西兰大耳白兔,均为成年雄性,随机分为四组:正常对照组、束缚组、电针非穴位组及电针穴位组。每组18只再各分为12h、24h、48h处死,总共72只。除正常对照组外,束缚组实验动物仰卧束缚于自制木板上四肢固定待测。电针穴位及非穴位组,同前束缚于木板上,电针穴位组毫针直刺一侧“三阴交”穴0.3-0.5cm,电针非穴位组毫针直刺“三阴交”穴向外旁开0.5cm处,两电针组刺激频率为2 Hz,刺激强度不超过0.6 mA,以局部皮肤肌肉轻微颤抖为度,留针约10 min,每隔20 min重复刺激,间断刺激6 h。各组分别于刺激后3h、6h及处死前于兔耳缘静脉采血。利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清CRH、ACTH、GHRH、GH、TRH、TSH激素水平,于处死后留取兔下丘脑、垂体组织制备石蜡切片行HE染色及原位细胞凋亡等病理学检测。结果:应激刺激实验动物后,动态检测动物血清激素浓度变化:CRH、ACTH、GHRH、GH、TSH激素水平较正常对照组有明显升高,统计学有显著差异(P< 0.05); TRH水平较正常对照组变化不明显(P>0.05);应激刺激后除正常对照组外ACTH、GH激素水平一直处于较高水平且相对平稳;CRH、GHRH、TSH激素水平在升高后6-12h波动较大,可能与多种途径的负反馈作用相关。应激刺激后与正常对照组比较实验各组TRH水平升高不明显,但电针穴位组及非穴位组12h后激素水平波动较大;实验各组电针穴位与非穴位组激素水平比较有一定差异;病理学检测中除正常对照组外,其余各组均可见下丘脑、垂体组织内棕褐色凋亡细胞,证实应激刺激可造成垂体、下丘脑分泌细胞水平的直接损伤。结论:1.应激刺激后急性期神经-内分泌改变明显:CRH、ACTH、GHRH、GH、TSH激素刺激后迅速升高,TRH变化不明显。2.应激刺激后CRH、GHRH、TRH、TSH激素水平有较大波动,而ACTH及GH激素水平较稳定且一直处于较高水平。3.应激急性期升高的激素水平,需一定时间才能恢复正常或稍高于正常。4.应激刺激后下丘脑、垂体组织病理检测可见凋亡细胞,且随应激强度增加,凋亡比例越高。过强的应激刺激对下丘脑-垂体腺细胞可产生直接损伤,可能成为PTHP发生的病理学基础。5.TBI后一年内,PTHP发生率较高,且影响患者预后,但对其诊断及激素替代治疗有待进一步研究和规范。
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