论文部分内容阅读
诸葛菜是一种观赏花卉,因其具有高含量的亚油酸和低含量芥酸,也是一种极为理想的新型油料植物资源;菘蓝为重要中药材植物,其叶片也可用作制造靛蓝染料的工业原料,具有很大应用价值,但二者在栽培过程中易受到病原菌的危害导致植株及产量受损。本研究通过农杆菌介导法将调节植物获得性抗性的关键基因NPR1(Nonexpressor of Pathogenesis-related Genes1)基因转入诸葛菜和菘蓝,以增强二者的抗性。得到的主要研究结果如下：1.组织再生培养过程中,通过对比子叶和下胚轴的分化再生率,发现诸葛菜下胚轴平均再生率远高于子叶再生率,而菘蓝子叶平均再生率高于下胚轴再生率,故后续试验中选择了诸葛菜下胚轴和菘蓝子叶为外植体进行遗传转化。2.外植体在不同卡那霉素浓度梯度培养基上的分化试验表明,诸葛菜以12mg/L为初次卡那筛选浓度,16mg/L为二次筛选浓度；菘蓝以6mg/L为初次卡那筛选浓度,9mg/L为二次筛选浓度,可以有效进行转化再生苗的筛选。3.通过根癌农杆菌EHA105为载体进行诸葛菜和菘蓝的遗传转化试验,以诸葛菜下胚轴为外植体置于激素含量为3mg/L6-BA,8mg/L TDZ,0.2mg/L NAA,2mg/L ZT的分化培养基上进行分化筛选；菘蓝子叶为外植体置于激素含量为3mg/L6-BA,0.2mg/L NAA,2mg/L ZT的分化培养基上进行分化筛选,经过卡那霉素的筛选作用,外植体分化出绿芽初步判定为转化苗。4.经PCR检测得到17棵呈阳性的诸葛菜转化植株；经PCR检测得到12棵呈阳性菘蓝转化植株。5.经RT-PCR检测和接种鉴定,得到的3株菘蓝转化苗有NPR1基因表达产物,6株菘蓝转化苗对丁香假单胞杆菌番茄变种致病菌表现出不同程度的抗性。结论：研究结果表明将NPR1基因转入菘蓝的方法可行且能够使其获得广谱抗性。