目的:运用现代检测技术与分析方法对金边土鳖药材质量标准进行全面系统的研究,拟定金边土鳖药材质量标准草案。方法:1.采用显微鉴别法对金边土鳖粉末进行观察。采用薄层色谱（TLC）鉴别方法对现行标准TLC鉴别方法进行优化,使方法更加适用于金边土鳖及其混伪品的鉴别。2.运用分子生物技术对金边土鳖COI、12SrRNA、16SrRNA、ITS2四段序列的鉴别效率进行分析比较,确定金边土鳖DNA条形码。基于上述分子研究基础,分析并设计特征引物,利用此引物应用位点特异性PCR的方法,完成鉴别。3.依据现行标准对24批金边土鳖药材水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物的含量进行检测。在此基础上,采用高效液相色谱（HPLC）法、超高液相色谱-质谱联用（UHPLC-MS）法、电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法分别对金边土鳖中黄曲霉毒素、兽药残留及无机元素限量进行检测分析。4.采用异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生化-高效液相色谱法对不同产地的金边土鳖药材及其混伪品进行指纹图谱研究,并对各批次样品的高效液相色谱进行相似度评价和聚类分析。采用高效液相色谱法建立金边土鳖中6种氨基酸成分的含量测定方法并规定限量。结果:1.发现了金边土鳖粉末中含有大量的脂肪油滴。建立了一种鉴别金边土鳖与其混伪品的薄层色谱鉴别方法。2.确定了金边土鳖COI、12SrRNA、16SrRNA、ITS2四段序列的PCR扩增条件。运用遗传距离检验、NJ树和ML树等分析手段综合评价各序列的鉴定效率,确定了12SrRNA序列能够成功区分金边土鳖及其混伪品,可作为金边土鳖DNA条形码的主要鉴别序列。并得出ITS2序列种间差异较明显,因此围绕该差异位点,设计出一对特征引物,建立了金边土鳖位点特异性PCR鉴别方法。3.24批金边土鳖药材中有14批样品符合《广东省中药材标准》（第二册）金边土鳖项下的规定。14批样品中有6批样品的黄曲霉毒素B1（≦5μg/kg）和黄曲霉毒素B1、B2、G1及G2总量（≦10μg/kg）符合规定;有6批样品的四环素类兽药残留符合《中国农业部第235号公告》中的规定（均≦100μg/kg）;14批金边土鳖药材中含有23种无机元素,其中共有元素有16种。4.建立了金边土鳖氨基酸HPLC指纹图谱共有模式,并确定了21个共有峰,指认了13种氨基酸成分。14批金边土鳖指纹图谱相似度计算结果显示,14批样品的相似度均在0.9以上,表明不同产地金边土鳖药材质量较稳定。在此基础上,同时测定了甘氨酸、精氨酸、苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、赖氨酸6种氨基酸成分的含量,并分别暂定其含量以干燥品计算,分别不得少于0.09%、0.27%、0.41%、0.07%、0.10%、0.26%。结论:本课题采用多样化的检测手段与分析方法对金边土鳖药材的鉴别、检查、指纹图谱及含量测定等方面进行系统研究,拟定了金边土鳖药材质量标准草案,为金边土鳖药材的质量控制及临床用药的有效性和安全性提供了实验依据,完善了现行标准。