论文部分内容阅读
目的：五红汤是民间广泛应用于防治化疗后骨髓抑制的应用经验食疗方,但到目前为止,尚缺乏临床及实验研究证据,本研究通过探讨食疗五红汤对初治的转移性肠癌患者及小鼠化疗后骨髓抑制的预防作用,并初步讨论其可能的作用机制,从而从临床及实验两方面证实其作用,为下一步临床治疗起指导作用。方法：1临床研究：采用前瞻性随机对照试验研究方法,按纳入与排除标准,将化疗初治的患者随机分为五红汤+化疗组与化疗组。化疗组在化疗期间仅予对症支持治疗；五红汤+化疗组于化疗前3天开始,每天服用200ml五红汤,连续17天。采用抗癌药物急性与亚急性毒副反应的表现及分度标准以及我国试行的生活质量量表,比较两组患者化疗前3天、化疗第3、7、14天外周血白细胞、血红蛋白、血小板变化及化疗前后患者生活质量的变化2动物实验研究2.1五红汤对小鼠骨髓抑制影响实验昆明种正常小白鼠40只,雌雄各半,复制小白鼠环磷酰胺(CTX)法骨髓抑制模型,随机分为两组(五红汤+化疗组、化疗组),每组各20只。五红汤+化疗组连续10天予五红汤灌胃,化疗组予等量生理盐水灌胃。每日观察小鼠给药后活动情况,并于实验第2、4、6、8天采用目内眦静脉取血法取血,测定外周血白细胞、血红蛋白及血小板计数。昆明种正常小白鼠40只,雌雄各半,均予0.2ml生理盐水腹腔注射,连续3天,随机分为两组(五红汤组,空白对照组),每组各20只,五红汤组连续10天予五红汤组灌胃,空白对照组予等量生理盐水灌胃。每日观察小鼠给药后活动情况,并于实验第2、4、6、8天采用目内眦静脉取血法取血,测定外周血白细胞、血红蛋白及血小板计数。2.2五红汤对小鼠骨髓造血祖细胞培养的影响实验实验第8天取血后,于每组小白鼠各随机取出10只,共40只处死,解剖出双后腿股骨,取骨髓制备成骨髓单细胞悬液,采用甲基纤维素半固体培养法培养中性粒细胞-巨噬细胞系造血祖细胞(CFU-GM)及红系造血祖细胞(BFU-E),分别于第3天、第7天计数集落数2.3五红汤对小鼠股骨骨髓细胞CD34阳性率表达影响的实验实验第10天,将每组剩余小白鼠,共40只均处死,解剖出双后腿股骨,取骨髓制备成骨髓单细胞悬液,加入小鼠CD34单克隆抗体,上流式细胞仪检测CD34+的表达情况。结果：1.临床研究结果2012年1月-2013年3月期间,共有60例住院患者完成本研究,五红汤+化疗组与化疗组各30例,所有患者均完成17天基本观察时间。1.1五红汤对转移性肠癌患者化疗首治期间外周血血常规的影响：①五红汤+化疗组与单纯化疗组患者外周血白细胞在化疗第-3、3、7、14天分别为：7.98±2.87vs7.81±5.57,7.70±3.57vs7.65±9.93,6.48±3.10vs8.51±9.02,6.14±2.31vs9.58±5.26,化疗期间五红汤+化疗组患者外周血白细胞计数呈现出持续下降趋势,化疗组患者白细胞计数呈先下降,后上升趋势,两组各时点相比无统计学差异(P>0.05)。②五红汤+化疗组与单纯化疗组患者外周血红蛋白值在化疗第-3、3、7、14天分别为：118.33±17.69vs112.50±20.45,111.63±15.60vs102.67±23.62,106.90±15.44vs96.57±16.65,116.73±15.99vs101.43±21.79,化疗期间两组患者外周血红蛋白值均呈现出下降趋势,第7天降至最低,后逐渐上升,五红汤+化疗组在治疗第7天、第14天外周血红蛋白明值显高于化疗组(P<0.01)。③五红汤+化疗组与单纯化疗组患者外周血小板计数在化疗第-3、3、7、14天分别为：304.40±95.12vs299.93±121.17,257.53±77.16vs258.47±116.61,234.87±98.24vs245.73±134.56,260.87±94.88vs231.93±115.38,在化疗期间外周血小板计数均呈现出下降趋势,两组各时点相比无统计学差异(P>O.05)。1.2五红汤对转移性肠癌患者化疗前后生活质量影响：五红汤+化疗组与单纯化疗组患者化疗前后生活质量评分分别为46.7±6.1vs47.3±5.8,43.7±4.5vs34.7±5.7,两组患者化疗后生活质量均出现下降,但五红汤+化疗组较化疗组在化疗前无明显统计学差异,化疗后,则明显优于单纯化疗组,两组相比有明显统计学差异(P<0.01)。2.动物实验研究结果2.1五红汤对外周血血常规的影响：2.1.1五红汤+化疗及化疗组小鼠外周白细胞计数在实验第2、4、6、8天分别为：1.84±0.32vsl.22±0.76,1.40±0.70vs0.88±0.51,1.22±0.52vs0.84±0.46,16.11±25.26vs5.38±2.50,在实验期间两组小鼠外周白细胞计数开始均呈现出下降趋势,第6天降至最低,第8天逐渐回升,各时点五红汤+化疗组外周血白细胞数值均高于单纯化疗组(P<0.05),差异有统计学意义；五红汤组及空白对照组小鼠在实验第2、4、6、8天白细胞计数分别为：4.32±1.28vs5.13±1.75,3.99±1.26vs4.75±1.84,7.68±2.64vs5.63±1.55,5.35±1.85vs3.80±1.12,五红汤组外周白细胞数第6、8天高于空白对照组(P<0.01)；五红汤+化疗组及单纯化疗组外周白细胞计数第2、4、6天均低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.1.2五红汤+化疗及化疗组小鼠外周血红蛋白值在实验第2、4、6、8天分别为：124.21±13.77vs52.75±30.80,52.75±30.80vs83.16±7.68,108.00±27.98vs80.53±17.23,74.00±12.84vs56.05±16.05,在实验期间两组小鼠外周血红蛋白值均呈现出下降趋势,第2、4、6、8天各时点五红汤+化疗组外周血红蛋白值明显高于单纯化疗组(P<0.01)；五红汤组及空白对照组小鼠在实验第2、4、6、8天分别为：131.50±13.29vs134.21±25.07,119.25±10.55vs105.53±20.20,132.75±11.53vs126.84±20.70,127.75±13.81vs101.32±15.71,单纯五红汤组在第4.8天高于空白对照组(P<O.01,P<0.05),五红汤+化疗组及单纯化疗组外周血红蛋白值均低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.1.3五红汤+化疗及化疗组小鼠外周血小板计数在实验第2、4、6、8天分别为：1093.95±158.74vs694.75±328.28,1330.00±196.60vs1019.40±373.49,1075.79±308.24vs998.25±320.39,799.21±295.18vs824.00±337.42,在实验期间两组小鼠外周血小板值均呈现出下降趋势,第2、4天五红汤+化疗组外周血小板计数明显高于单纯化疗组(P<0.01)；五红汤组及空白对照组小鼠血小板计数在实验第2、4、6、8天分别为：1036.32±341.58vs1096.00±215.73,986.32±242.19vs1069.00±261.83,1345.53±343.55vs1122.00±161.19,1316.58±307.69vs1316.58±307.69,单纯五红汤组第6、8天高于空白对照组(P<0.01,P<0.05)；五红汤+化疗组第4、8天外周血小板均明显低于空白对照组(P<0.01),单纯化疗组第2、8天低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.2五红汤对骨髓造血祖细胞培养影响的结果：2.2.1五红汤+化疗组、化疗组、五红汤组、空白对照组CFU-GM分别为49.10±15.67,32.10±16.76,65.80±14.34,62.60±7.20,其中五红汤+化疗组小鼠CFU-GM高于单纯化疗组(P<0.05),单纯五红汤组与空白对照组相比较无统计学差异,五红汤+化疗组CFU-GM与空白对照组无明显差异,单纯化疗组CFU-GM明显低于空白对照组(P<0.01)。2.2.2五红汤+化疗组、化疗组、五红汤组、空白对照组BFU-E分别为：2.90±1.37,1.80±1.69,8.60±2.50,7.10±1.37,五红汤+化疗组BFU-E与单纯化疗组无统计学差异,单纯五红汤组与空白对照组无统计学差异,五红汤+化疗组及单纯化疗组外周血白细胞均低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。2.3五红汤对CD34+表达率影响的结果：五红汤+化疗组、化疗组、五红汤组、空白对照组CD34表达率为60.60±10.75%,47.57±3.78%,82.64±4.02,72.08±5.43%,五红汤+化疗组CD34+明显高于单纯化疗组(P<0.01),单纯五红汤明显高于空白对照组(P<0.01)。,五红汤+化疗组及单纯化疗组外周血白细胞均低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论：1.五红汤对预防初治转移性肠癌化疗后血红蛋白降低具有一定疗效,对血小板的降低有缓解趋势,但数据无统计学意义,对白细胞未观察到有效。2.五红汤内服安全,可能有助于改善患者化疗后生活质量。3.五红汤对CTX骨髓抑制模型小鼠白细胞、血红蛋白、血小板降低均可能有缓解作用,对化疗后CFU-GM减少亦可能有预防性保护作用,对BFU-E减少有缓解趋势,但是统计学无意义。4.在对小鼠骨髓造血祖细胞进行流式细胞检测后,五红汤+化疗组的CD34+的比例远高于化疗组,而五红汤组的CD34+比例高于空白对照组,提示五红汤的预防骨髓抑制的机制可能与其抑制化疗小鼠造血祖细胞的凋亡有关