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泰地罗新(Tildipirosin,TIP),是大环内酯类泰乐菌素的衍生物,也是一种新型的半合成抗菌药。此药对呼吸系统疾病的治疗尤为显著,如胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌以及引起牛呼吸道疾病的病原菌,如溶血性曼海姆菌、多杀性巴氏杆菌、睡眠嗜组织菌等都具有特效。目前,在我国还未上市,属于正在研究中的新兽药。本实验的研究目的主要是针对泰地罗新注射液药物残留分析方法验证学的建立,以及该注射液在猪体内残留量的检测。检测的条件:应用API4000 Qtrap液相色谱-质谱联用仪,采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,检测方式为多反应监测(MRM)扫描模式,喷雾电压:5.5kV,离子源温度(TEM):600℃,气帘气(CUR)压力:20psi,雾化气(GS1)压力:35psi,辅助加热气(GS2)压力:40psi,碰撞气(CAD)压力:9psi。泰地罗新和艾司唑仑用于定量的离子为(735.4/98.2,m/z)和(295.050/267,m/z),应用色谱柱为 SynergiPolar-RP(2.5 μm,2×50 mm)S/N:H15-010633 并以 A:0.1%甲酸-水和 B:0.2%甲酸-乙腈为流动相,按0.01min(95:5),0.80min(95:5),1.50min(5:95),3.50 min(5:95),3.51 min(95:5),5.00 min(95:5)进行梯度洗脱,流速0.400mL/min,进样针润洗液为乙腈,进样量为10μL,进样器温度为4℃。组织样品处理:首先称取适量的样品组织,进行匀浆,并将已匀浆好的样品取出2 mL,加入2 mL超纯水,用高速匀浆机再次匀浆。然后,匀浆组织中加入400 μL甲醇/乙腈沉淀剂(含50 ng/mL艾司唑仑内标溶液),涡旋混匀,涡旋5 min进行提取,4000r/min离心10min,小心吸取上清200μL进样。5个组织的标线泰地罗新溶液在5.00ng/mL-500ng/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数均在0.998,最低定量限在5.0ng/mL,5个组织的回收率均在90%以上。泰地罗新稳定性研究,包括样品室温的稳定性、-70 ℃冻融的稳定性、处理后样品在自动进样器温度(4 ℃)的稳定性、处理后样品室温的稳定性、工作液室温放置的稳定性均良好且符合生物样品的分析要求。该研究实验方法具有操作简便,灵敏度高等优点,因此很适合泰地罗新药物残留的研究。本实验建立了良好的分析方法验证学,针对泰地罗新注射液在猪体内的残留量进行了研究。结果显示,猪组织中的皮肤脂肪和肌肉在15 d时均低于最低定量限,而肺组织和肾组织在15 d的含量分别为47.2 ng/mL和81.25 ng/mL,肝组织的浓度为94.85 ng/mL。