细菌耐药是自古有之的自然现象,但随着抗生素的发现和使用,大大加快了细菌耐药的步伐,产生了众多的耐药细菌,甚至“超级细菌”,进而在全球引发了一场世界性的医学危机。本文以“超级细菌”耐药靶酶-金属β-内酰胺酶为研究的立足点,成功表达和纯化了金属p-内酰胺酶L1,并对其进行了光谱、稳态动力学、热重和差示扫描量热分析表征和荧光标记。接着,本论文首次研究和报道了金属酶催化水解反应的热动力学行为,从热力学方面更深入的认识了L1催化青霉素G的水解反应,为搜寻金属p-内酰胺酶的广谱型抑制剂提供了重要的信息。合成和搜寻金属β-内酰胺酶的广谱型抑制剂一直是该领域的研究热点和难点,本文以樟脑和硫代乙酸为潜在抑制剂开展了相关研究,结果发现两者均不能有效的抑制三个亚组的代表性金属p-内酰胺酶CcrA(B1亚组)、ImiS(B2亚组)和L1(B3亚组)。在传统方法无法杀灭耐药细菌的情况下,本文研究了利用光动力学疗法从另一个角度来灭活耐药细菌。本文成功合成了三大类的新型荧光抗生素作为光敏剂,分别是荧光素-先锋Ⅳ、荧光素-卡那霉素KanF和荧光素-去甲万古霉素VanF,具有荧光探针功能的VanF经光动力学实验发现,其能很好的产生单线态氧102来灭活枯草杆菌,当其浓度为7.5μM时,杀死率为70%左右。