【摘 要】
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目的:探讨咖啡酸(Caffeic acid,CA)抗糖基化低密度脂蛋白(glycated low-density lipoproteins,g LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)炎症损伤的作用及可能机制;方法:将HUVEC细胞随机分4组,空白对照组(正常培养细胞不加干预)、模型组(g LDL组,100μmol/L
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目的:探讨咖啡酸(Caffeic acid,CA)抗糖基化低密度脂蛋白(glycated low-density lipoproteins,g LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)炎症损伤的作用及可能机制;方法:将HUVEC细胞随机分4组,空白对照组(正常培养细胞不加干预)、模型组(g LDL组,100μmol/L糖基化低密度脂蛋白处理24h)、g LDL+5μmol/L咖啡酸组(5μmol/L咖啡酸预处理2h,再加100μmol/L g LDL处理24h)、g LDL+10μmol/L咖啡酸组(10μmol/L咖啡酸预处理2h,再加100μmol/L g LDL处理24h);Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测各组细胞活力;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡;采用ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血管细胞粘附分子(VCAM-1)、C反应蛋白(CRP)分泌情况;采用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测内质网应激标志性蛋白CHOP和GRP78相对m RNA表达量;Western blotting测定TNF-α、IL-6、p-p65,p65,p-IκB,IκB的蛋白表达量;结果:与空白对照组比较,模型组细胞活力明显降低,凋亡细胞比率显著增加,TUNEL阳性细胞数量增加;细胞上清中炎性因子TNF-α和IL-6含量增加、细胞粘附分子CRP、MCP-1及VCAM-1水平显著升高;与模型组相比,咖啡酸预处理组细胞存活力明显增加、凋亡细胞比率降低、细胞内炎性因子和粘附分子分泌减少。与正常对照组相比,模型组细胞内内质网应激水平(CHOP和GRP78增加)和氧化应激水平(ROS含量增加)明显增加,咖啡酸可明显降低HUEVC细胞内质网应激和氧化应激水平。Western blotting结果表明,与正常对照组比较,模型组p-IκB及p-p65表达水平增加,而咖啡酸预处理组p-IκB及p-p65表达水平则显著低于模型组组。结论:咖啡酸具有缓解糖基化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞炎症损伤的作用,其机制可能与减轻氧化应激和内质网应激所致的细胞损伤,抑制NF-κB介导的炎症信号通路有关。
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