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传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis virus，IBV)是引起禽类传染性支气管炎的病原体，长期以来一直持续的给禽类养殖业造成巨大的威胁。疫苗的使用是预防该病的重要手段，快速准确的病原和抗体检测诊断方法是临床诊断与预防效果检测的重要手段。为此，本论文开展了此项研究工作。 针对主要流行的呼吸型、肾型以及肌肉型4/91毒株，基于S1基因和nsp12基因片段设计出三对特异性引物，建立了IBV的RT-PCR分型检测方法。使用该引物进行PCR扩增，肾型IBV可以得到213bp和686bp的两条带，4/91型毒株可以得到213bp和261 bp的两条带，而呼吸型毒株只能得到213bp的一条带，其它常见禽类病毒未扩增出相应片段。扩增产物经测序分析验证为IBV特定的序列。使用该方法对呼吸型和肾型IBV毒株的cDNA最低检出量为0.225 ng，肌肉型4/91型最低检出量为2.25 ng。分型PCR方法对60份临床组织样品检测结果与鸡胚病毒分离结果完全一致，表明本研究建立的RT-PCR分型检测方法与病毒分离方法具有很好的吻合度。 以IBV H120为毒种，摸索了传染性支气管炎病毒血凝抗原的制备方法，结果显示，血凝抗原的制备条件为超滤结合差速离心将IBV的抗原浓度浓缩至109.0EID50/0.1 mL，浓缩的IBV毒液用终浓度为2.5-3 U/mL的PLC1或50％的A型产气荚膜梭菌培养上清在37℃水浴3-4小时即可制备IBV血凝抗原。研究了血凝抑制试验的待检样品处理方法，证明，待检血清在进行血凝抑制试验之前必须用25％的酸化高岭土处理90分钟。分析了血凝抑制试验的反应条件，证明，血凝抑制试验的反应温度为4℃，反应时间为45-60分钟。灭活方法为0.1％的β-丙内酯于4℃处理抗原24h。人工免疫后的抗体水平检测结果显示该检测方法相比于ELISA方法可以识别更早期的抗体。 IBV肾型毒株SC021202经SPF鸡胚连续传代获得的F60代病毒液，以0.1mL、0.2 mL两个剂量，借助滴鼻方式感染1、7、21、60日龄的SPF鸡，测定了IBV SC021202毒株鸡胚适应60代毒的致病性。结果显示:1日龄0.1mL组的死亡率为70％，0.2 mL组的死亡率为90％;7日龄的死亡率均为40％，而21、60日龄的鸡感染后无明显临床症状。剖检病死鸡可见肾脏出现明显的肿胀，内有白色尿酸盐沉积，呈现典型的“花斑肾”样病变。排毒动态检测结果显示，排毒时间为感染后4-10天。组织病料的病毒核酸检测结果显示，肾脏的检出率高于气管和肺脏。1、7日龄的组织病料阳性率要显著高于21、60日龄。这些数据说明，IBVSC021202毒株在鸡胚适应60代仍具有较强的致病性。