高分子量麦谷蛋白1Dx2+1Dy12亚基缺失的分子机理及其与小麦加工品质关系的研究

来源 :中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxbear0
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小麦是世界上最重要的粮食作物之一,小麦加工产品的种类非常广泛。面筋蛋白是小麦主要的储藏蛋白,很多研究已经证明面筋蛋白中的高分子量麦谷蛋白亚基与小麦的加工品质密切相关,主要决定面团的弹性和粘弹性。 本课题的研究材料是冀92-3235的突变体。突变体材料来源于野生型幼胚组织培养过程中的辐射处理,然后经过四代稳定选育。 与对照野生型相比,突变体的农艺性状变化不大,高分子量麦谷蛋白1Dx2+1Dy12亚基完全检测不到,低分子量麦谷蛋白亚基和醇溶蛋白在电泳检测中显示没有差异,而粗蛋白质含量没有变化。品质检测后发现,突变体的湿面筋在冲洗过程中几乎检测不到,只有在网筛上有少量残留;Zeleny沉降值下降一半;麦谷蛋白大聚体(GMP)的含量下降明显。 对1Dx2+1Dy12亚基缺失的分子机理展开研究,主要采用PCR的方法。分别在1Dx2/1Dy12亚基基因的上游非编码区,编码区,和下游非编码区设计特异性引物,也使用高分子量麦谷蛋白亚基研究中通用的编码区引物。用引物分别在突变体和对照野生型的基因组DNA中进行扩增,大部分引物只有在野生型中有相应的扩增,而在突变体中没有扩增;部分引物虽然在突变体中得到扩增,但是扩增片段却不是目标DNA片段。用编码区引物在野生型和突变体的cDNA中进行扩增,结果也是在突变体中得不到相应的扩增产物。1Dx2和1Dy12亚基基因虽然紧密连锁,但是在染色体上相隔仍有很大的距离。二者同时缺失,而且编码基因同时都扩增不到,由此推测1Dx2+1Dy12亚基缺失的分子机理是:染色体上1Dx2+1Dy12亚基编码基因位点,Glu-D1位点附近较大DNA片段的缺失。 选择距离Glu-D1位点较近的SSR引物,Xgwm642,分别在突变体和野生型的基因组DNA中进行PCR扩增,结果突变体中确实有条带的缺失。 突变体材料中Glu-D1位点附近较大DNA片段的缺失导致了1Dx2+1Dy12蛋白亚基的完全缺失,而突变体的总蛋白含量没有变化,加工品质发生了很大的改变。说明是1Dx2+1Dy12亚基的缺失导致了品质的变化。虽然传统的观念认为1Dx2+1Dy12亚基劣于1Dx5+1Dy10亚基,但是1Dx2+1Dy12亚基在小麦的加工品质中仍是起着非常关键的作用。
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