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目的:基于课题组前期研究发现,远志具有胃肠动力抑制副作用,而厚朴取汁炮制远志能降低胃肠动力障碍毒副作用。本研究从细胞水平阐释厚朴汁炙远志炮制品改善胃动力障碍的部分分子机制。 方法:本文采用体外培养胃起搏细胞——Cajal细胞(ICC),利用其自发的生理活动受离子和神经递质影响的原理,考察厚朴汁炙远志炮制品对钙离子通路和一氧化氮的影响。①采用MTT法,考察空白组、远志组、厚朴组、炮制品高、中、低剂量组、远志配厚朴1:2组水煎液与单味远志10g/kg组、单味厚朴20g/kg组、厚朴汁炙远志炮制品30、15、7.5g/kg组、远志配厚朴1:2(30g/kg)组含药血清对胃Cajal细胞活力(GICC)的影响。②采用分光光度法、ELISA法,分别考察各含药血清组对GICC细胞内外游离Ca2+浓度、ATP酶、IP3活性的影响。③采用免疫印迹法,观察空白组、单味远志10g/kg组、单味厚朴20g/kg组、炮制品30 g/kg组含药血清对GICC细胞内nNOS表达量的影响。 结果:①对GICC活力的影响:单味远志水煎液有降低细胞活性的趋势,厚朴组与炮制高剂量组水煎液组的细胞活性均显著高于远志组(P<0.05);远志10g/kg含药血清则能显著降低细胞活性(P<0.05),厚朴20g/kg组、炮制品30g/kg组、远志配厚朴1:2(30g/kg)组含药血清均极显著高于远志10g/kg含药血清组(P<0.01)。②对GICC钙离子通路的影响:单味远志10g/kg含药血清组细胞内游离Ca2+浓度、ATP酶活性、IP3浓度显著高于空白组(P<0.05,P<0.01),炮制品30g/kg含药血清组细胞外游离Ca2+浓度显著高于空白组(P<0.01);而单味厚朴20g/kg组、厚朴汁炙远志炮制品30、15 g/kg组、远志配厚朴1:2(30g/kg)组各含药血清组的细胞内Ca2+浓度、ATP酶活性、IP3浓度显著低于远志10g/kg含药血清组(P<0.05,P<0.01),单味厚朴20g/kg组、厚朴汁炙远志炮制品30、15 g/kg组各含药血清组的细胞外Ca2+浓度显著高于单味远志10g/kg含药血清组。③对一氧化氮通路的影响:免疫印迹法检测结果显示:单味远志10g/kg含药血清组的nNOS的表达明显高于空白组,单味厚朴20g/kg、炮制30g/kg含药血清组的表达明显下降。 结论:①单味远志含药血清能抑制胃动力起搏细胞活性,使细胞钙离子内流导致钙超载,诱发细胞凋亡,还能使胃间质细胞nNOS表达增强影响胃动力;②单味厚朴及厚朴汁炙远志炮制品含药血清均能显著增强细胞活力,缓解细胞钙超载,维持细胞稳态,下调nNOS表达,通过调节GICC钙离子及一氧化氮通路,保护ICC细胞发挥缓解胃动力障碍,说明厚朴发挥着重要作用。