萱草花抗抑郁活性部位神经递质调控作用研究

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萱草花,又名黄花菜、金针菜、忘忧草,是百合科多年生药食同源的植物。现代药理学研究证明萱草花提取物具有镇静、抗抑郁作用。本课题对萱草花总黄酮的回流提取以及大孔树脂纯化工艺进行研究,并初步建立萱草花质量控制的方法,在其抗抑郁活性部位筛选和评价的基础上,对其抗抑郁作用及机制进行探讨研究。1萱草花提取纯化工艺研究最佳提取纯化工艺为:固液比为1:30,用90%的乙醇提取1.5 h,将0.5g生药/mL提取液1BV湿法装入AB-8大孔树脂柱,分别用4BV蒸馏水、5BV10%乙醇、30%乙醇、50%乙醇洗脱,收集10%、30%、50%乙醇洗脱液,最佳工艺提取最终得到萱草花黄酮的纯度约为61.27%。2萱草花质量标准研究以芦丁为标准品,应用UPLC法建立了含量测定方法,以含量测定方法为基础,采用UPLC法,初步建立以9批不同产地萱草花的指纹图谱,方法学考察结果良好。3萱草花提取物神经修复作用的研究通过建立高浓度皮质酮损伤、谷氨酸损伤和过氧化氢损伤的体外模型,通过MTT法和LDH法检测细胞存活率来考察萱草花柱层析产物对PC12神经细胞的修复作用。结果表明,萱草花10%、30%、50%乙醇柱层析组分对上述三种模型都有优于其他组分的神经修复活性,这种神经修复作用可能通过促进细胞增殖、减少细胞内LDH的漏出来实现的。4萱草花提取物对神经细胞中神经递质及其代谢产物含量的影响用LC-MS/MS方法考察了萱草花10%、30%、50%乙醇柱层析组分对皮质酮、谷氨酸、过氧化氢损伤模型的PC12细胞内外液中DA、NE、ACh、GABA、Glu、TRP及其代谢产物5-HT、5-HTP和5-HIAA含量变化的影响。实验结果表明萱草花10%、.30%、50%乙醇柱层析组分可改善模型细胞中神经递质的功能减退,逆转细胞中神经递质含量的变化。综上,本研究发现萱草花黄酮抗抑郁作用的可能机制与维持各类神经递质的稳态有关,为进一步阐明其抗抑郁作用机制奠定了基础,也为研发以萱草花黄酮为基础抑郁症保健品提供了科学依据。
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