论文部分内容阅读
西藏猫乳又名“生等”,为鼠李科猫乳属植物,是一种我国传统的藏药。现有文献记载,西藏猫乳中含有柚皮素、山萘酚、槲皮素、墨沙酮、大黄酚、没食子酸、8-甾醇、混合脂肪酸、混合脂肪酸酯等化合物。其中含有多种黄酮类成分。药理方面,据记载其具有祛风湿、抗炎、消肿止痛、降压、敛干黄水等功效,可治疗类风湿性关节炎、麻风病、高山多血症、高血压、黄水疮等疾病,外用消肿、治疮毒等。为系统的研究西藏猫乳中所含的化合物及生物活性,本论文对西藏猫乳进行了提取、分离和结构鉴定,同时对西藏猫乳不同极性提取部分的抗氧化活性、镇痛抗炎活性和抗类风湿性关节炎活性进行了初步探讨。结果如下:1.采用70%的乙醇浸提西藏猫乳干燥木质部,提取液过滤、蒸馏、浓缩得浸膏。将浸膏用热水溶解,然后依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取,至萃取层无色。收集合并不同极性萃取层,减压蒸馏,蒸干。采用硅胶色谱法,石油醚:乙酸乙酯=100:1-10:4和二氯甲烷:甲醇=20:1-1:5为洗脱剂,对不同极性萃取物进行洗脱分离,半制备高效液相法对样品作进一步分离。分离得到4种单体化合物。采用NMR等方法对分离得到的西藏猫乳单体化合物进行结构鉴定。这些化合物分别为对羟基苯甲酸乙酯(Ⅰ)、对羟基苯甲醛(Ⅱ)、柚皮素(Ⅲ)和槲皮素(Ⅳ)。其中,对羟基苯甲酸乙酯(Ⅰ)和对羟基苯甲醛(Ⅱ)首次在该植物中发现。2.采用普鲁士蓝法、DPPH法和Fenton法测定西藏猫乳醇提物各极性萃取组分的还原力,·OH自由基的清除能力以及抗氧化的活性。3种抗氧化实验结果表明乙酸乙酯、乙醇和正丁醇部分均具有明显的抗氧化活性。其中用DPPH法测得提取部分的IC50值分别是乙酸乙酯0.0605 mg·ml-1、正丁醇0.0763 mg·mL-1、乙醇0.0833mg·mL-1。结论:萃取物清除率与样品浓度存在明显的剂量-效应关系,当三种提取部分的浓度大于1.0mg·mL-1时,清除效力可达到60%,其还原能力几乎接近甚至超过Vc。其中在大极性萃取层的抗氧化活性和还原力最强。说明西藏猫乳具有良好的抗氧化活性,是优良的天然抗氧化剂。3.采用醋酸扭体法和二甲苯所致的小鼠耳肿胀法测定西藏猫乳各极性提取部分的镇痛抗炎活性。实验结果表明:西藏猫乳乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和乙醇提取部分均能够抑制醋酸引起的小鼠扭体反应和二甲苯引起的小鼠耳肿胀,其中乙醇提取部分的抗炎镇痛效果略高于乙酸乙酯和正丁醇萃取物组。说明西藏猫乳具有一定的镇痛抗炎活性。4.采用弗氏完全佐剂法建立大鼠类风湿性关节炎模型,研究了不同浓度西藏猫乳乙醇提取物对大鼠类风湿性关节炎病程的影响。通过检测大鼠形态变化、病理切片、脏器指数、白细胞指数和血沉等指标以评价西藏猫乳对类风湿性关节炎的治疗作用。结果表明:西藏猫乳能有效降低关节炎指数、缓解关节红肿等症状。同时,白细胞数和血沉指数也明显低于模型组。说明西藏猫乳提取物对类风湿性关节炎有一定的治疗作用,为开发治疗类风湿性关节炎新药提供理论依据。