背景:自噬是一种依赖溶酶体途径对胞浆大分子物质和细胞器进行降解的过程,在进化过程中高度保守,随着对其机制的深入了解,自噬已经被证明参与多种疾病,包括肿瘤(Yang,Chee et al.2011)。RNA的可变剪接又称选择性剪接,是基因调控的一个重要步骤,是转录后的前体m RNA通过不同的剪接加工方式,产生不同m RNA剪接亚型的过程。可变剪接的失调会导致异常剪接亚型的产生,可能引起肿瘤的发生和肿瘤耐药性(Wang,Sandberg et al.2008)。目前这两种重要细胞生物学过程之间的联系尚不清楚。丝氨酸/精氨酸富集剪接调控因子3(serine/arginine-rich splicing factor 3,SRSF3)是一个重要的可变剪接调控因子,已被证明是一个原癌基因,在多种肿瘤中都高表达,对于肿瘤的形成、发展都有重要的作用(Jia,Li et al.2010)。目的:本研究将探索口腔鳞状细胞癌中剪接调控因子SRSF3与自噬的关系。方法:1.用低氧诱导口腔癌细胞CAL 27,SCC-9或Fa Du细胞发生自噬,采用RT-PCR技术筛选发生显著变化的剪接调控因子,并利用免疫印迹实验验证其表达变化。2.用免疫印迹实验检测口腔癌细胞中上调或者下调SRSF3表达后,自噬的变化情况;用激光共聚焦观察GFP-LC3融合蛋白的表达情况。3.用RT-PCR和免疫印迹实验检测在上调或下调SRSF3表达的口腔癌细胞中,自噬相关基因BECN1,Fox O1,p65的表达情况。将T7-SRSF3质粒与BECN1,Fox O1,p65质粒共转染到口腔癌细胞中,免疫印迹实验检测自噬的变化情况。结果:1.在CAL 27,SCC-9或Fa Du细胞中,我们通过低氧诱导自噬的发生,发现大量剪接调控因子RNA水平降低。其中剪接调控因子SRSF3的降低程度最为显著,且SRSF3的表达与自噬表达相关指标呈负相关。2.下调SRSF3的表达,细胞的自噬活性增加,相反,上调SRSF3的表达抑制低氧诱导的自噬。3.下调SRSF3的表达后,自噬的相关基因Fox O1,p65和BECN1的表达增强,而过表达SRSF3产生相反的结果。过表达BECN1,P65,或Fox O1可以挽救SRSF3对自噬的抑制作用。结论:SRSF3在口腔癌细胞中通过抑制自噬相关基因Fox O1,p65和BECN1的表达,抑制自噬。