【摘 要】
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目的：构建pcDNA3.1／Myc-His(-)A-HPV16E6重组质粒，转染人外周血来源的树突状细胞(dendritic cell，DC)，制备DC基因疫苗，检测其生物学特性，体外诱导并测定细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic
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目的：构建pcDNA3.1／Myc-His(-)A-HPV16E6重组质粒，转染人外周血来源的树突状细胞(dendritic cell，DC)，制备DC基因疫苗，检测其生物学特性，体外诱导并测定细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)活性，进而观察其对CaSki荷瘤小鼠的治疗作用和在SCID小鼠体内的免疫防治效应。 方法：1、应用PCR方法从HPV16感染细胞中扩增HPV16E6，并应用基因重组技术构建pcDNA3.1／Myc-His(-)A-HPV16E6重组质粒。2、无菌采集健康成人外周血，采用密度梯度离心及贴壁法分离纯化得到单核细胞，细胞因子rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-a联合诱导单核细胞向DC分化，采用阳离子脂质体Lipofectamine介导HPV16E6重组质粒转染DC，制备HPV16E6-DC疫苗。动态形态学观察，免疫细胞化学、流式细胞术检测E6基因及新鲜、冻融DC疫苗表面分子的表达情况；另取pcDNA3.1-HPV18E7重组质粒转染DC制备HPV18E7-DC疫苗。3、HPV16E6-DC疫苗小鼠腹腔输注2次，间隔3d，70d后检测疫苗是否具
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