黄绿青霉素（CIT）是主要由黄绿青霉菌分泌产生的一种具有很强生物活性的次级代谢产物，黄绿青霉菌是很容易引起粮食作物和饲料发生霉变的真菌之一。人类或者动物摄入被真菌毒素污染的食品，或者通过口腔呼吸系统吸入和皮肤接触等都可能引发多种症状，如幻觉、呕吐、出血、皮炎、神经受损，甚至死亡。在很多科学研究表明，毒素在体内积累后会导致畸形、癌症、突变、白细胞缺失等对机体造成伤害，因此世界各国都非常高度重视对食品中毒素残留量的控制与检测。研究出一种具有快速、灵敏、特异、经济、样品的纯度要求不高、适合于大批量样本的检测方法变得极其重要。本为旨在建立CIT的酶联免疫检测法（ELISA）。CIT是一种小分子化合物，不具有免疫原性的半抗原，使得它必须通过与载体蛋白偶联才能获得免疫原性，然后用其免疫刺激小鼠产生抗体。本文通过高碘酸钠氧化法制备了偶联化合物，用作免疫抗原CIT-BSA和包被抗原CIT-KLH。通过紫外扫描、红外扫描、SDS-PAGE等方法对偶联产物验证分析，随后免疫BALB/c小鼠，制备了抗体，并对ELISA进行条件的优化。根据ELISA方法得到酶标二抗最佳稀释倍数为1:7000，ELISA甲醇溶剂浓度为5%。CIT抗体的IC50是0.56μg/ml，抗体对其他真菌毒素的交叉反应率均小于0.05%，显示出较好的特异性。CIT在大米粉中的添加回收率在70.5±0.08%~95.4±0.18%之间，批间变异系数小于18.7%，批内变异系数小于18.3%。通过本课题的研究，我们成功的制备了CIT的人工完全抗原，并且制备了相应的抗体，利用这些抗体，建立了酶联免疫吸附法，为最终开发单克隆抗体、单链抗体为依托的检测试剂盒与胶体金检测卡奠定基础。