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目的:随着生活节奏越来越快,生活压力越来越大,食管良性病如胃食管反流、责门失弛症的发病越来越高。2000年Adam报告西方国家每日体验到烧心者为5％-10％,40％的人每月有过烧心的症状[1]。我国7％的人每日至少受到一次烧心症状的困扰,31.9％每月至少一次烧心症状。人食管下括约肌(LES)是位于食管和胃的交界部的一簇肌肉组织[2]。它在维持正常的消化系统功能中具有极其重要的生理功能。1979年,Liebermann-Meffert等首次提出LES由位于胃小弯侧呈半环形的钩状纤维(clasp fibres)和位于大弯侧呈斜行分布的套索纤维(sling fibres)共同构成。钩状纤维和套索纤维两类平滑肌纤维之间的协同作用共同形成了LES的高压带,但其功能机制研究尚不完善。这两束肌纤维与膈脚一起在食管胃结合部形成高压带,维持LES的关闭状态,使LES形成一种类似单向阀门的结构。正常状态下,由于LES的持续性收缩使胃内容物不能反流入食管,另一方面,由于LES的适时舒张允许了食物继续下行入胃,或呕吐和打嗝,使胃内的液体或气体反流如食管并经口腔排出[17,18-20]。LES的收缩和舒张功能调节机制非常复杂,包括了神经系统、体液因素及自身肌源性等多种因素。目前针对套索纤维及钩状纤维收缩的信号转导机制的研究,国外主要是利用实验动物进行相关研究,但是这与人类有着种属和生理学的差异;对LES功能研究的中外文献,特别是针对人食管下括约肌的1,4,5-三磷酸肌醇受体(1,4,5-IP3R)不同亚型(IP3R1、IP3R2、IP3R3)还没有。本实验旨在通过测定胃小弯侧呈半环形的钩状纤维(claspfires)和位于大弯侧呈斜行分布的套索纤维(sling fibres)中1,4,5-三磷酸肌醇受体(1,4,5-IP3R)不同亚型(IP3R1、IP3R2、IP3R3)的表达的关系,为进一步探讨食管良性病,从而更为完善的阐述人LES调节机制,尤其是贲门失弛缓症和胃食管反流病的发生、发展的途径提供理论基础。
方法:本研究组织标本取自河北医科大学第四医院胸外科2009年2月～2009年7月住院的40例在我院因食管上中段癌行食管癌切除术的患者标本,手术切除的(手术标本上切缘,距肿瘤边缘＞5cm并且病理检查无癌侵润的组织)新鲜食管胃连接部手术标本,锐性剥去胃贲门部及食管下段的粘膜层及粘膜下层后,制备套索纤维(S)、钩状纤维(C)。病人术前均无烧心和反酸症状,亦无贲门失弛缓症及硬皮病等可能导致食管下括约肌功能障碍的疾病史或药物服用史。本研究经河北医科大学伦理委员会批准,所有患者均知情同意。全部病例术前均未行放射性核素治疗及化学药物治疗。采用免疫组织化学方法,检测40例食管手术切除标本中食管下括约肌组织的IP3R1、IP3R2和IP3R3的表达,利用统计软件SPSS17.0进行统计学分析,探讨其在食管下括约肌的钩状纤维(clasp fibres)和套索纤维(sling fibres)中的关系。
结果:IP3R1受体在钩状纤维(clasp fibres)和位于套索纤维(sling fibres)表达量最高,其次是IP3R.2;IP3R3在钩状纤维(clasp fibres)和套索纤维(sling fibres)中均无表达。在两种组织中IP3R1受体表达阳性细胞为胞浆表达,呈黄色或棕黄色颗粒沉着,在两种组织中IP3R1阳性表达率不同(套索纤维、钩状纤维组织中分别为67.5％和42.5％),IP3R1在套索纤维、钩状纤维组织中x2=5.115,P=0.041,差异有统计学意义(P＜0.05)。在两种组织中IP3R2阳性表达率不同(套索纤维、钩状纤维组织中分别为52.5％、37.5％),IP3R2在套索纤维、钩状纤维组织中x2=1.818,P=0.261,差异无统计学意义(P＞0.05)。
结论:3种IP3R.1、IP3R2受体在胃小弯侧呈半环形的钩状纤维(claspfibres)和位于大弯侧呈斜行分布的套索纤维(sling fibres)有表达,分别是IP3R1受体表达量最高,其次是IP3R.2;IP3R3在钩状纤维(clasp fibres)和套索纤维(sling fibres)中均无表达。IP3R1在套索纤维组织中比在钩状纤维组织中表达量高,IP3R2在套索纤维组织中比在钩状纤维组织中表达量高。