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猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica, Bb)能够广泛感染哺乳动物,并且造成急慢性的呼吸道疾病。人偶尔有感染该菌的报道,尤其是有免疫力缺陷的人群和小孩。支气管败血波氏杆菌和其他病原体之间具有协同作用,可以增加呼吸系统的发病率和严重程度。例如,能够和巴氏杆菌引起猪的传染性萎缩性鼻炎(Swine infectious atrophic rhinitis, AR),该病可导致育肥猪生长迟滞,降低饲料的利用率,给养猪业造成巨大的经济损失。本研究分成两个部分,具体如下：第一部分,本研究通过DNAstar等软件对猪支气管波氏杆菌的鞭毛基因序列(flagellum gene, Genbank登陆号：EU327790, AJ012319, L13034)进行比对分析,在LAMP引物设计网站设计LAMP引物。经过LAMP反应体系条件的优化,确定了25μl的反应体系。进行了LAMP方法的特异性试验,结果显示,仅Bb产生特异性条带,说明所建Bb的LAMP方法具有高度的特异性。进行了LAMP方法的敏感性试验,结果显示,常规PCR方法检测Bb的极限为9×102个拷贝,LAMP的检测灵敏度为9.0x10个拷贝,表明LAMP方法的检测灵敏度是常规PCR检测方法的10倍。最后进行了LAMP方法的临床试验,通过对31份猪肺脏病料与46份疑似感染猪鼻腔拭子分别进行细菌分离、PCR、LAMP三种方法检测后,发现猪肺中细菌分离、PCR方法、LAMP方法的检出率分别为9.67%(3/31)、19.4%(6/31)、32.3%(10/31),而疑似感染组中三种方法的阳性率为19.57%(9/46)、58.14%(20/46)、69.77%(28/46),且LAMP与细菌分离、PCR方法的阳性符合率为100%,说明本LAMP方法更加适合于Bb的临床检测。第二部份,2012年4至2013年4月间,利用本研究所建立的LAMP方法及参照Townsend等提出的检测产毒素性巴氏杆菌的PCR方法分别对来至四川省的438份鼻腔拭子样品进行了Bb与产毒紊性巴氏杆菌(T+Pm)检测。本研究通过对四川省部分地区的规模化猪场的Bb及T+Pm进行流行病学调查,初步掌握了Bb及T+Pm在四川省的流行状况,从Bb的调查结果看来,小规模养殖场30日龄以下、30-90日龄、90日龄以上仔猪的Bb阳性率分别为24.29%(17/70)、39.19%(29/74)及21.79%(17/78),而大规模养殖场30日龄以下、30-90日龄、90日龄以上仔猪的Bb阳性率分别为32.31%(21/65)、40.26%(31/77)、20.27%(15/74),应用凝集试验检测血清样品,检测结果结果显示,438份血清样品的总阳性率为51.59%,小规模养殖场30日龄以下、30-90日龄、90日龄以上仔猪的Bb抗体阳率分别为37.14%(26/70)、51.35%(38/74)、55.13%(43/78),大规模养殖场的阳性分别为38.46%(25/65)、63.64%(49/77)、60.81%(45/74)。结合Bb与T+Pm阴性猪只临床表现,表明四川省猪群中还存在相当数量的隐性感染者或病原携带者,若不及时淘汰隐性感染猪,势必造成本病的爆发与流行,给猪场造成极大危害。