如何对包含体蛋白进行正确的体外折叠,以期能够获得高浓度、高收率的活性蛋白产品是蛋白质工业化应用的瓶颈。为此本文对模型蛋白溶菌酶进行了研究。首先考察了盐酸胍、DTT、变性时间对变性过程中自由巯基数、残余活力及稀释复性率三个参数的影响。当溶菌酶浓度为15mg/mL时得出变性条件是6M盐酸胍,5mM DTT, 在36℃及100 rpm摇床中60min能够彻底还原变性,且复性效果最好。复性液中DTT的存在对复性效果没有影响。接着研究了去污剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)的人工分子伴侣体系对变性-还原溶菌酶的氧化复性效果。相继考察了各种因素对复性率的影响。结果发现,溶菌酶最佳的复性操作条件为:pH值8. 1,半胱氨酸作二硫键重排剂,浓度为1-2mM,CTAB与β-CD的最佳的复性浓度分别为0. 6-1. 2mM和30mg/1. 5mL。此外复性率随酶浓度的升高有所降低。最后,在β环糊精的基础上合成了固态环糊精β-CDP,其大小在50-200μm之间,呈无色透明状。β-CDP对溶菌酶的复性效果由于受到固液传质的影响,对于溶菌酶浓度为50pμg/mL时只达到40%的复性率,但重复利用率较好。为人工分子伴侣的固定化研究和复性应用打下了基础。