小鼠成纤维细胞制备保存及和胚体心肌细胞共培养研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:czx66czx
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小鼠胚体成纤维细胞的培养是制备饲养层的重要途径,其制备、传代及冷冻保存均有不同的研究报道,饲养层的质量受许多因素的影响,如动物的品种、培养液、所传代数及实验条件等,关于饲养层制备过程中的胚体细胞培养、传代、冷冻后的细胞形态、组织学等方面的研究报道很少,故本实验以昆明小白鼠为实验动物,研究其胚体培养过程中细胞的形态学、组织学等方面的变化,以期为本实验室建立饲养层细胞库提供理论依据,同时探讨心肌细胞和成纤维细胞层共培养的可行性,以期为心脏生物学特性的体外研究奠定基础。 选取妊娠11~16天的昆明系小白鼠胚胎为实验材料,通过对不同胚龄的小鼠胚胎成纤维细胞进行培养,以确定分离原代胚胎成纤维细胞的最适胚龄,并且通过对相同条件的小鼠胚胎成纤维细胞用几种不同的方法进行冷冻保存,从而确定冷冻保存小鼠胚胎成纤维细胞的最适方法,此外,将小鼠胚胎成纤维细胞与小鼠胚胎心肌组织及乳鼠心肌组织进行共培养,以期心肌组织能够与成纤维细胞层共培养且发生自律性收缩,并且通过电镜观察对小鼠胚胎成纤维细胞、小鼠胚胎心肌细胞以及与集团性心肌细胞相似但未收缩的细胞团进行结构比较。 研究结果表明:(1)用不同日龄小鼠胚胎(11~16d)分离培养成纤维细胞,其生长状况、铺层时间及寿命以13d、14d小鼠胚胎效果最佳。(2)体外培养的原代小鼠胚体成纤维细胞随培养时间的增加,核质比逐渐增加。(3)胚胎冷冻法可以使成纤维细胞取得较好的冷冻保存效果,解冻活率最高可达0.86。降温速率可以加快到0.60~1.0℃/min,平衡时间以2~2.5h为宜。(4)小鼠胚体成纤维细胞可以与心肌细胞团共培养,并出现自律性收缩,细胞团逐渐增长,其收缩情况随温度变化而变化,随时间变化其形态学发生变化,而且并非所有心肌细胞团都能收缩。
其他文献
<正>2014年11月至2015年4月,笔者在日本讲谈社研修了近5个半月。讲谈社是日本最大的综合性出版社,与中国国家新闻出版广电总局间的出版交流项目持续了二十多年。作为第23期研
钢琴曲《梅花三弄》作为一首由古琴曲创编而成的乐曲,一经问世便得到国内外听众的喜爱,本文从文化学的角度出发,首先分析梅花在中国传统文化中的重要影响,进而对钢琴曲的从文
<正>随着新媒体技术的兴起与全球传播话语的多元化,第三世界国家电视媒体开始在国际新闻竞争中崭露头角,并在一定程度上对美英电视机构的独大地位构成冲击。2011年,时任美国
1950年代初期,鉴于共产党在法国议会选举中得票率过高的现状,美国心理战略委员会负责制定了编号为PSB D-14c的心理战略计划,试图以此有效遏制共产党在西欧特别是在法国的发展
目的通过观察针刺结合音乐疗法对焦虑模型大鼠海马谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)含量和二者比值的影响,探讨此方法的部分抗焦虑机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为空白组
在激烈的竞争中,创新是满足客户所看中的特殊需要的法宝。在商业银行面临全球金融一体化和国内银行激烈竞争局面的时候,求变求新是商业银行的必然选择。随着经济的快速发展,
脱硫废水零排放已成为环保的热点问题,燃煤烟气脱氯是一项实现脱硫废水零排放的新技术,其原理是将碱基溶液雾化喷入除尘器之前的烟道内,脱除烟气中的HC1等强酸性气体并固化到
国企的档案管理工作对其生产、经营等各项活动起着举足轻重的作用。本文对当前国企档案管理工作中存在的问题进行了分析,并提出了有针对性的解决对策,以期对提高新时期下国有
随着社会主义市场经济体制深入发展,企业像雨后春笋般涌现,其中小微企业数量上占比高,而且成为市场发展的新趋势,在推动社会主义市场经济发展中发挥极其重要的作用,不仅为我
目的:通过研究心肌细胞衰老相关炎症指标的变化,探讨hUC-MSCs对H2O2诱导的H9c2衰老心肌细胞的保护作用及可能机制。方法:本实验用终浓度为30μmol/L,50μmol/L,100μmol/L,15