vhb基因在斑贝链霉菌中的整合表达及其对默诺菌素合成的影响

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Joexie2005
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
斑贝链霉菌是磷酸糖脂类抗生素默诺菌素的主要产生菌,它严格好氧,发酵液粘稠而溶氧极差。因此溶氧成为默诺菌素高产的限制性因素之一。本研究通过在斑贝链霉菌中整合表达透明颤菌血红蛋白基因(vhb)来改善氧的传递,进而提高菌体生长和抗生素产量。 接合转移是一种有效的基因转移手段。它可以避开胞外核酸酶对外源DNA的降解,而且操作程序简单,已在多种链霉菌中成功应用。本实验首次探索了斑贝链霉菌接合转移,发现接合转移是一种高效的基因转移手段。 红霉素抗性基因启动子(ermEp)是能在链霉菌中组成型表达的强启动子。通过SOE-PCR技术将vhb结构基因置于ermEp下,使vhb基因高效表达。为了vhb基因更好的表达,通过OOE-PCR技术对ermEp启动子-35区TGG密码子进行缺失诱变,产生更强的启动子ermE~*p。 pSET152是一类链霉菌整合表达载体,将vhb基因连接到pSET152上,分别构建了表达载体pBIB2004和pBIB2005。通过大肠杆菌-链霉菌属间接合转移导入斑贝链霉菌中,PCR验证表明vhb基因成功整合到染色体上。CO结合差光谱和Western Blot分析表明工程菌表达出有生物活性的透明颤菌血红蛋白(VHb)。 摇瓶发酵初步证实VHb蛋白的表达可促进默诺菌素的合成和菌体的生长。20L发酵罐摸索发现促生长和产素作用不太明显,可能与工艺进一步优化有关。相关实验需要继续。
其他文献
<正> 本文从日本学生学习汉语的难点出发,在元音辅音以及声调等方面对汉、日语音进行生理、物理和心理的对比实验。①所做的对比实验及提出的一些学习方法和建议,希望对语音
本文针对多进制连续相位调制解调(CPM)技术解调复杂的缺点提出了一种可以减少CPM接收机复杂度的调制解调方案。详细论述了其研究背景、工作原理、结构设计以及实验结果和数据
<正>【裁判要旨】合同一方当事人违约时,减损规则限制了守约方对救济权的选择,守约方要求违约方继续履行的主张可能不被支持,且特定情况下,减损规则还要求守约方积极采取合理
为了减轻农民负担、维护农村社会的稳定,让农民休养生息。国务院办公厅于2000年在安徽省进行农村税费改革试点工作,2001年暂缓推行,2002年全面推开,直到2005年取消农业(特产)
在信息经济大环境下,与传统产品相比,在线信息产品有着自身鲜明的经济技术特征,消费在线信息产品的消费者也因时代背景、文化传统和经济环境的变化而具有新的特征。如何把信息产
情绪过程与认知过程一样,本质上都是脑的功能。音乐与情绪之间有着必然的内在关联。音乐情绪感知的脑电研究,就是以音乐为情绪诱发源、以脑电数据分析为手段而进行的情绪脑机
目的观察甲硝唑冲洗在会阴切开缝合术中的临床疗效。方法选择440例行会阴侧切分娩的产妇,随机分为治疗组240例和对照组200例。治疗组在会阴切口缝合前先用0.5%甲硝唑注射液10
目的探讨热毒宁注射液治疗小儿急性上呼吸道感染伴发热的疗效。方法将158例急性上呼吸道感染伴发热患儿随机分为3组,治疗Ⅰ组55例给予热毒宁注射液每天0.5~0.8ml/kg加入5%葡萄
类型化是叙事作品中表现人物的重要的手法之一。无论是在渊源久远的小说作品中,还是在充满民族气息的元杂剧里,类型化的人物塑造现象都十分的活跃,面对这种创作状态,前人已经
详细介绍了MES系统的生产过程控制、过程质量信息控制,成品质检信息控制、以及人员出勤和效益的控制原理。最后,对实施MES系统后,给企业带来的经济效益等进行了总结。