丽蝇蛹集金小蜂毒囊共生菌对两种昆虫生长发育的影响及其致病机理初探

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昆虫共生菌具有调控寄主生长发育的功能,实验室前人在丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis毒囊中分离培养得到两种芽孢杆菌L4-1和L6-1。通过饲喂试验中发现L4-1对家蝇幼虫致死效果明显。本研究以L6-1为对照,通过毒囊共生菌饲喂试验、生理生化物质的测定和比较细菌基因组,探究L4-1对寄主家蝇和亚洲玉米螟生长发育的影响。研究结果初步探讨了寄生蜂毒囊共生菌作为生防菌剂的生防潜力,为害虫防治提供新思路。主要结论如下:(1)通过饲喂浓度为OD600为0.2、0.5、1、3和6的L4-1,均显著降低了家蝇的化蛹率、羽化率和存活率。随着L4-1浓度的升高,家蝇的化蛹率、羽化率和存活率有显著下降的趋势。饲喂不同浓度的L6-1对家蝇的存活率均无显著性影响。饲喂不同浓度的L4-1显著降低了亚洲玉米螟的化蛹率和存活率。随着L4-1浓度的升高,亚洲玉米螟的化蛹率和存活率有显著下降的趋势。而饲喂不同浓度的L6-1对亚洲玉米螟的化蛹率、羽化率和存活率均无显著性影响。(2)通过OD600为1的寄生蜂毒囊共生菌饲喂两性生命表试验可知,L4-1对家蝇发育历期包括幼虫期、蛹期、产卵前期(APOP)、总产卵前期(TPOP)和雌雄虫寿命均产生显著性影响。与L6-1对比,L4-1显著降低了家蝇的化蛹率、羽化率和繁殖力。L4-1和L6-1对亚洲玉米螟发育历期包括幼虫期、蛹期、产卵前期(APOP)和雌雄虫寿命均无显著性影响。与L6-1相比,L4-1显著降低亚洲玉米螟的化蛹率,对亚洲玉米螟幼虫有显著致死效果。(3)与L6-1对比,L4-1显著降低了亚洲玉米螟的可溶性蛋白含量、亚洲玉米螟四龄幼虫、五龄幼虫和蛹期的SOD酶活性、亚洲玉米螟三龄幼虫的POD的酶活性和亚洲玉米螟五龄幼虫和蛹期的CAT酶活性。(4)L4-1鉴定为Bacillus safensis L4-1,L6-1鉴定为B.velezensis L6-1。由COG和KEGG数据库注释发现,L4-1可能在物质转运方面强于L6-1。通过分析毒力基因发现,与L6-1相比,L4-1所特有的侵染系统类基因Lpe A,使L4-1更具有侵染性;L4-1所特有的铁吸收系统类基因Ent、Pyoverdine和Mycobactin,可能使L4-1更好地在虫体内生存并且发挥毒力;L4-1所特有的肽聚糖修饰酶基因Oat A和金属蛋白酶基因免疫抑制剂A(Inh A),可能帮助L4-1逃避寄主的免疫系统。
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