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2000年5月~2001年2月通过采集花粉并进行杂交授粉,共获得种内和种间杂交5个组合。然后离体培养底来特×爱莫无核、爱莫无核×黑龙江实生、爱莫无核×北醇、爱莫无核×江西-2、长穗无核白×黑龙江实生以及自然授粉的底来特、无核白和红光无核的胚珠,对影响无核葡萄胚珠培养的取材时期、基本培养基、不同外源激素类型及其浓度配比、蔗糖浓度、水解乳蛋白和低温处理程序等因素进行了研究。主要取得了以下研究结果:1.获得了一批杂交后代试管苗和部分移栽苗通过胚挽救技术,以无核葡萄品种作为母本的5个组合共获得了151株幼苗。其中种内杂交的底来特×爱莫无核100株;种间杂交的爱莫无核×江西-2 17株,长穗无核白×黑龙江实生16株,爱莫无核×北醇12株,爱莫无核×黑龙江实生6株;另外还有68株自然授粉的无核白,47株自然授粉的红光无核,35株自然授粉的底来特。营养钵移栽成活60株,并成功地栽植到大田。2.确定了不同品种及杂交组合的最佳取材时期不同品种及杂交组合胚挽救的最佳取材时期不同,大致介于授粉后20天~50天之间。具体表现为:自然授粉的底来特与底来特×爱莫无核两组合均是授粉后50天,自然授粉的无核白是授粉后37天,爱莫无核×黑龙江实生是授粉后30天,爱莫无核×北醇在授粉后47天浆果变软时取材最适宜,爱莫无核×江西-2在授粉后50天浆果变软时取材最适宜,长穗无核白×黑龙江实生是授粉后20天。3.筛选出了最适宜胚挽救的基本培养基取自然授粉后40天、43天、48天的红光无核离体胚珠分别接种在N5、Do、B5 三种基本培养基中培养。结果表明,以Nitsch为基本培养基培养效果最好。另外,在基本培养基上,一般在授粉后,取材培养时添加6%的蔗糖,80天~90天后,转接到2%蔗糖的胚萌发培养基上培养,幼胚萌发10天~20天后,再转接到2%蔗糖的成苗培养基上,促使胚发育、萌发及成苗效果最佳。4.探索了外源激素的作用及其适宜的浓度影响胚挽救的外源激素主要是IAA、BA和GA3,3者不同浓度配比对试管幼苗的获得影响较大。其中最适宜底来特×爱莫无核的是2.0mg/L IAA、0.5mg/L BA 、0.5mg/L GA3,而最适宜自然授粉的无核白的是1.0mg/L IAA 、0.5mg/L BA 、0.5mg/L GA3。5.建立了适宜无核葡萄胚挽救的应用操作程序本研究将无核葡萄胚挽救过程分为三级培养。首先将胚珠取出,接种在一级培养基——胚珠培养基上,培养80天~90天,挽救其中的幼胚;然后转移到二级培养基——胚萌发培养基上诱导胚萌发;最后将萌发10天~20天的幼胚转移到三级培养基——成苗培养基上使之直接成苗。