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胚胎晚期富集蛋白(Late embryogenesis abundant proteins, LEA蛋白)是一类多家族蛋白，它们在种子胚胎发育的晚期丰富聚集，在整个生物界广泛分布。LEA基因除组成型表达之外，还受到部分植物激素以及环境因素的诱导表达。许多研究已表明，LEA蛋白与植物的抗逆性关系密切，过表达LEA基因可以提高受体植物的抗逆性。烟草作为一种重要的模式生物，在研究其他植物LEA基因功能时应用十分普遍。本次研究利用差异显示反转录聚合酶链式反应(mRNADifferential DisplayPCR，即DDRT-PCR)与分子克隆方法从高温处理的大豆幼胚中克隆到一个Lea基因。通过测序及生物信息学分析，基因表达的组织特异性，及其在不同胚龄胚中的表达分析探究该基因的功能。为进一步探究大豆Lea5基因的功能，通过农杆菌介导法把大豆Lea5基因转入烟草，研究该基因的生物学功能，主要研究结果如下：1.大豆Lea5基因的克隆与表达分析(1)运用DDRT-PCR技术和分子生物方法克隆得到大豆Lea5基因，该基因全长449bp，经Blastp比对分析，大豆Lea5蛋白为LEA-3亚家族成员，是由113个氨基酸组成的蛋白质，预测其相对分子量为12.283KDa，等电点为10.12，脂肪族氨基酸指数为89.646，不形成典型的二级结构。(2)半定量RT-PCR分析表明，该基因在大豆幼胚中的表达不具有组织特异性；并且与组织的发育程度不相关。2.农杆菌介导的大豆Lea5基因对烟草的遗传转化(1)构建了pBI121-Lea5表达载体。(2)烟草遗传转化。以烟草叶盘为外植体，通过农杆菌介导，用含有50mg/L卡那霉素的筛选培养基筛选抗性植株，并利用目的基因大豆Lea5基因与卡那霉素抗性基因NPTⅡ的PCR检测，共获得4个株系的转大豆Lea5基因烟草。半定量RT-PCR分析转Lea5基因烟草株系叶片中大豆Lea5基因的表达。不同转基因株系中目的基因的表达量是不同的，其中株系TL17和TL32的表达量较高。通过SDS-PAGE蛋白质电泳方法检测转大豆Lea5基因烟草植株中外源基因的表达，比较转Lea5基因烟草和野生型烟草的蛋白质电泳图谱，我们并没有发现有特异蛋白质条带出现。