sCD40L联合HSP70-H22肽复合物刺激DC诱导特异性抗肝癌免疫的研究

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目的:探讨受sCD40L与TB.HSP70-H22肽联合刺激的DC在体内外诱导的特异性抗肝癌免疫方法:1.取小鼠骨髓于培养7d分为未刺激组、sCD40L组、TB.HSP70-H22肽组、sCD40L+TB.HSP70-H22肽组4组,分别给与相应干预,24h后,取上清ELISA法检测IL-12、IL-10,FACS检测CD40、CD80;混合淋巴细胞反应(MLR)检测刺激指数(SI),MTT法检测对肝癌细胞特异性杀伤率;2.建立小鼠肝癌模型,完全随机分为5组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组),分别给予生理盐水和以上四种干预获得的DC干预,第21日,测肿瘤湿质量,ELISA法测血清IL-10、INF-γ。结果:1.和未刺激组比较,各组的IL-10水平均降低,TB.HSP70-H22肽组、sCD40L+TB.HSP70-H22肽组的CD40、CD80、IL-12、SI与H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义(p<0.05);sCD40L组的SI与H22细胞特异性杀伤率的差异无统计学意义(p>0.05);2.和sCD40L组比较,TB.HSP70-H22肽组IL-10降低,SI和H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义(p<0.05),CD40、CD80、IL-12差异无统计学意义; sCD40L+TB.HSP70-H22肽组IL-10降低,CD40、CD80、IL-12、SI与H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义(p<0.05);3.和TB.HSP70-H22肽组比较,sCD40L+TB.HSP70-H22肽组的IL-10降低,CD40、CD80、IL-12、SI与H22细胞特异性杀伤率升高,差异均具有统计学意义(p<0.05);4.与Ⅰ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低, INF-γ升高,差异具有统计学意义(p<0.05),Ⅱ、Ⅲ组各项指标差异均无统计学意义;5.与Ⅱ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低,INF-γ升高,差异均具有统计学意义(p<0.05),Ⅲ组各项指标差异均无统计学意义(p>0.05);6.与Ⅲ组比较,Ⅳ、Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低,INF-γ升高,差异均具有统计学意义(p<0.05);7.与Ⅳ组比较,Ⅴ组肿瘤湿质量和IL-10降低,INF-γ升高,差异均具有统计学意义(p<0.05)。结论:受sCD40L与TB.HSP70-H22肽复合物联合刺激后的DC被充分激活,能诱导强有力的特异性抗肿瘤细胞免疫,对H22瘤细胞产生强大的杀伤作用,显著抑制肝癌的生长。
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