【摘 要】
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B7分子是一种重要的免疫细胞因子,属协同刺激分子(Costimulatory molecule)免疫球蛋白超家族(Immunoglobin superfamily,IgSF)成员,其中B7-2因其在APC上表达时间早、表达丰度
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B7分子是一种重要的免疫细胞因子,属协同刺激分子(Costimulatory molecule)免疫球蛋白超家族(Immunoglobin superfamily,IgSF)成员,其中B7-2因其在APC上表达时间早、表达丰度高、易诱导表达,被认为是在免疫反应初期决定T细胞命运即对刺激应答或无应答的关键分子。近年来肿瘤免疫分子机理研究业已证实,抗B7单抗有望成为有效的治疗恶性肿瘤的生物制剂。另外,通过特异性阻断协同刺激信号B7/CD28以及CD40/CD40L的传导,可获得外周性免疫耐受。因此,对抗人B7-2单链抗体的表达和活性研究具有重要的应用价值。单链抗体由于分子小,减少了免疫原性,实体组织穿透力强,血浆半衰期短,因而在临床疾病的诊断和治疗中具有重要的应用价值。
本研究在成功制备抗人B7-2单链抗体的基础上取得了以下成果：⑴通过Bac to Bac杆状病毒表达系统,构建并筛选了含抗人B7-2单链抗体基因的重组AcBacmid和HyBacmid,并在昆虫细胞(Tn5)和BmN细胞-家蚕体内进行了表达；⑵构建了含信号肽的抗人B7-2单链抗体基因的哺乳动物细胞表达载体,并在哺乳动物细胞中进行了分泌表达；⑶对不同表达系统表达的抗人B7-2单链抗体进行了生物学活性的比较研究。
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