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目的:1、构建人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型;2、观察重组ANXA10过表达慢病毒对HepG2裸鼠皮下移植瘤体生长情况的影响及其对移植瘤细胞中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。初步阐明ANXA10基因对人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤瘤体增殖、凋亡的影响及肝癌侵袭及转移相关的细胞因子MMP-9、VEGF的影响。方法:1、制备浓度为1×10~7个/ml的HepG2细胞悬液,取0.2ml细胞悬液注入裸鼠右侧腋下。24天后,瘤体最大直径长至1.7-2.0cm时,取出瘤体,剪成1mm×1mm×1mm大小组织块,分别接种至24只雌性裸鼠右侧腋窝皮下,每3天测量瘤体大小,计算瘤体体积。2、组织块移植后7天,瘤体直径长至0.3-0.5cm时,将裸鼠随机分为3组,分别命名为实验组(LV-ANXA10组)、阴性对照组(空载慢病毒组)、空白对照组。每只动物给予慢病毒量为2×10~7TU (100ul),空白对照组给予等量的PBS;3h后重复注射一次。4周后处死24只裸鼠,并取出裸鼠皮下瘤体。采用RT-PCR在分子水平检测ANXA10基因mRNA的变化,采用免疫组化在组织层面检测ANXA10蛋白的表达,并运用同样的方法分别从基因和/或组织水平检测MMP9、VEGF表达的变化。tunel法检测各组瘤体细胞凋亡情况。结果:1、成功构建人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型1、成功构建人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型2、实验组裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑制,体积和重量均明显小于阴性对照组和空白对照组(体积: F=19.13,P<0.01;重量:F=46.91,P<0.01)3、半定量PCR及免疫组化结果显示:实验组裸鼠瘤体较阴性对照组及空白对照组的ANXA10mRNA和蛋白表达明显升高;同时,肝癌侵袭转移相关的细胞因子MMP-9、VEGF mRNA和蛋白表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。4、TUNEL结果显示:实验组裸鼠瘤体组织凋亡指数为27.87±1.20%,阴性对照组和空白对照组分别为3.47±0.72%、3.38±0.77%,实验组与阴性对照组和空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1、ANXA10基因过表达抑制人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤的生长并促进其凋亡。2、ANXA10基因过表达对人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤内与肝癌侵袭转移相关的细胞因子MMP-9、VEGF可能存在抑制效应。